过表达CSRP1基因可促进人肺腺癌H1299细胞的增殖、迁移和侵袭

摘要：

目的:探讨半胱氨酸和甘氨酸丰富蛋白1(cysteine and glycine rich protein 1, CSRP1)基因过表达对人肺腺癌H1299细胞增殖、周期、迁移和侵袭的影响,及其可能的作用机制.方法:构建携带有CSRP1基因的重组慢病毒质粒pCDH-CSRP1;将重组慢病毒Ad-CDH-CSRP1和pCDH-GFP(空载体对照组)分别感染人肺腺癌H1299细胞.实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测CSRP1 mRNA及蛋白在H1299细胞中的表达水平.CCK-8法和克隆形成实验检测CSRP1基因过表达对H1299细胞增殖能力的影响;FCM法检测CSRP1基因过表达对H1299细胞周期的影响.Transwell小室迁移实验和划痕愈合实验检测CSRP1基因过表达对H1299细胞纵向和横向迁移能力的影响,Transwell小室侵袭实验检测对细胞侵袭能力的影响.蛋白质印迹法检测CSRP1基因过表达对H1299细胞中黏着斑激酶(focal adhesion kinase, FAK)和磷酸化FAK (phospho-FAK, p-FAK)蛋白表达水平的影响.结果:重组慢病毒质粒pCDH-CSRP1构建成功.转入重组慢病毒质粒pCDH-CSRP1的H1299细胞中CSRP1蛋白的表达水平较pCDH-GFP组明显提高(P<0.01).CSRP1基因过表达可促进H1299细胞增殖(P<0.05), G1期细胞所占百分比明显下降(P<0.01),S期细胞所占百分比明显上升(P< 0.01); CSRP1基因过表达可明显增强H1299细胞的迁移和侵袭能力(P值均< 0.01).CSRP1基因过表达的H1299细胞中p-FAK蛋白的表达水平明显升高(P<0.01),而总FAK蛋白的表达水平无明显变化(P> 0.05).结论:CSRP1基因过表达可增强人肺腺癌H1299细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与FAK信号转导通路的激活有关.

关键词：肺肿瘤、细胞增殖、细胞运动、细胞周期、CSRP1基因

所属期刊栏目：38

分类号：R737.9(肿瘤学)

资助基金：1.国家自然科学基金资助项目编号:817028462.上海市卫生和计划生育委员会科研计划资助项目编号:20174Y0183.1. National Natural Science Foundation of China81702846;2. Science Research Program Supported by Shanghai Municipal Commission of Health and Family Planning20174Y0183

在线出版日期：2018-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：291-299