雷公藤红素通过内质网应激相关通路促进人骨肉瘤HOS细胞凋亡

摘要：

目的:观察雷公藤红素对人骨肉瘤HOS细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:用不同浓度(0、1.5、2.5、3.5和4.5 μmol/L)的雷公藤红素处理骨肉瘤HOS细胞24 h后,采用CCK-8法检测细胞活性,确定最佳实验浓度.采用倒置相差显微镜观察细胞形态变化,Hoechst33258染色后相差显微镜观察细胞凋亡的形态学改变,FCM法检测细胞凋亡率和细胞内Ca2+浓度变化,蛋白质印迹法检测结合免疫球蛋白(binding immunoglobulin protein,BIP)、钙联蛋白(calnexin,CNX)、内质网氧化还原酶1-Lα(endoplasmic reticulum oxidoreductin 1-L alpha,Ero1-Lα)、蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide isomerase,PDI)、肌醇依赖酶1α(inositol-requiring enzyme 1 alpha,IRE1α)、蛋白激酶样内质网激酶(protein kinase-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)和磷酸化PERK (phosphorylated-PERK,p-PERK)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)、剪切型caspase-12 (cleaved-caspase-12,c-caspase-12)和c-caspase-3的表达变化.结果:不同浓度的雷公藤红素均可抑制HOS细胞活性(P值均＜0.05),且呈浓度依赖性.3 μmol/L雷公藤红素处理24 h后,HOS细胞形态明显萎缩、紊乱,漂浮细胞增多,且出现明显核固缩和核碎裂等典型的细胞凋亡形态学改变.与未处理对照组相比,3 μmol/L雷公藤红素处理24 h后细胞凋亡率和细胞内Ca2+浓度明显升高(P值均＜ 0.05).3μmol/L雷公藤红素处理24 h后,内质网应激相关标志蛋白BIP、CNX、Ero1-Lα、PDI、IRE1α和p-PERK以及内质网应激介导凋亡相关蛋白CHOP、c-caspase-12和c-caspase-3的表达水平明显升高(P值均＜0.05).结论:雷公藤红素可诱导人骨肉瘤HOS细胞凋亡,其作用机制可能与内质网应激介导细胞凋亡通路有关.

关键词：骨肉瘤、内质网应激、细胞凋亡、雷公藤红素

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分类号：R738.1(肿瘤学)

资助基金：1.国家自然科学基金资助项目编号:815726342.重庆市教育委员会研究生科研创新项目编号:CYS151411.National Natural Science Foundation of China No.815726342.Postgraduate Innovational Research Project of Chongqing Education Board CYS15141

在线出版日期：2017-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：901-908