微RNA-186在人肝细胞肝癌中的表达及作用

摘要：

目的:检测微RNA-186(miRNA-186,miR-186)在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织和细胞中的表达水平,以及其对肝癌SMMC-772细胞生物学特性的影响.方法:采用实时荧光定量PCR法检测34对HCC组织及其对应癌旁组织中miR-186的表达情况,同时检测4株HCC细胞(HepG2、Hep3B、SMMC-7721和BEL-7402)以及正常肝细胞株HL-7702中miR-186的表达情况.将携带有miR-186-模拟物(mimics)和miR-186-抑制物(inhibitor)的真核表达载体转染至SMMC-7721细胞后,分别采用CCK-8法、FCM法以及Transwell小室迁移和侵袭实验检测细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的变化.分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法进一步检测miR-186对靶基因ROCK1的作用.结果:miR-186在HCC组织中的表达量为0.034±0.033,明显低于其在癌旁组织中的表达量0.077±0.056 (P＜0.001).临床病理学特征分析结果显示,HCC组织中miR-186的表达量与肿瘤大小和TNM分期有关(P值均＜0.05).miR-186在HCC细胞中的表达量均明显低于正常肝细胞(P值均＜0.05),其中以在SMMC-7721细胞中的表达水平最低.与对照组相比,miR-186-mimics组细胞在各时间点的增殖活性均明显降低,而miR-186-inhibitor组细胞在各时间点的增殖活性均明显升高(P值均＜0.05);miR-186-mimics组细胞的凋亡率明显升高,而miR-186-inhibitor组细胞凋亡率明显降低(P值均＜ 0.05);miR-186-mimics组细胞的迁移和侵袭能力明显降低,而miR-186-inhibitor组细胞的迁移和侵袭能力明显增强(P值均＜0.05).过表达miR-186能够降低ROCK1 mRNA及蛋白的表达水平,抑制miR-186表达则会上调ROCK1 mRNA及蛋白的表达水平(P值均＜0.05).结论:miR-186在HCC组织和细胞中均低表达,并能够通过下调ROCK1的表达来抑制HCC细胞的增殖、迁移和侵袭,同时促进细胞凋亡.

关键词：癌、肝细胞、微RNAs、细胞增殖、细胞凋亡、肿瘤侵润

所属期刊栏目：37

分类号：R735.7(肿瘤学)

在线出版日期：2017-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：750-761