微RNA-490-5p抑制人肝内胆管细胞癌RBE细胞的侵袭和迁移

摘要：

目的:研究微RNA-490-5p(microRNA-490-5p,miR-490-5p)在人肝内胆管细胞癌组织中的表达情况,并探讨其对肝内胆管癌RBE细胞侵袭和迁移能力的影响及可能的分子机制.方法:采用实时荧光定量PCR法检测miR-490-5p在5对肝内胆管细胞癌组织及其癌旁正常组织中的表达水平.利用脂质体瞬时转染法将miR-490-5p模拟物及其阴性对照转入人肝内胆管细胞癌RBE细胞中.随后,采用划痕愈合实验以及Transwell小室迁移实验检测RBE细胞迁移能力的变化,TranswellH小室侵袭实验检测RBE细胞侵袭能力的变化;最后,通过CCK-8法、平板克隆形成实验和FCM法检测RBE细胞增殖及凋亡的变化.应用在线miRNA靶基因预测软件预测miR-490-5p的靶基因,并采用蛋白印迹法对预测的靶基因进行验证.结果:miR-490-5p在人肝内胆管细胞癌组织中明显下调(P＜0.05).与阴性对照组相比,miR-490-5p模拟物转染组RBE细胞的增殖、克隆形成能力和凋亡均无明显变化(P值均＞0.05);划痕愈合实验以及Transwell小室迁移实验检测结果显示,RBE细胞的迁移能力被明显抑制(P值均＜0.05);Transwell小室侵袭实验检测结果显示,RBE细胞的侵袭能力被明显抑制(P值＜ 0.05).TargetScan网站预测转录因子FBJ骨肉瘤癌基因(FBJosteosarcoma oncogene,c-Fos)可能是miR-490-5p的潜在靶基因;蛋白质印迹法证实,miR-490-5p模拟物转染组细胞中c-Fos蛋白的表达水平明显下调(P＜0.05).结论:miR-490-5p在人肝内胆管细胞癌组织中低表达,而且其可能通过下调c-Fos的表达来调控人肝内胆管细胞癌RBE细胞的迁移和侵袭.

关键词：肝内胆管癌、微RNAs、肿瘤侵润、细胞增殖、c-Fos基因

所属期刊栏目：37

分类号：R735.8(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81272402;National Natural Science Foundation of China81272402

在线出版日期：2017-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：700-709