根皮素诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡并抑制其裸鼠移植瘤的生长

摘要：

目的:探讨根皮素对前列腺癌PC-3细胞凋亡和周期的影响,及对其裸鼠移植瘤生长的影响.方法:不同浓度的根皮素(0、20、50和100 μmol/L)分别作用于人正常前列腺基质细胞WPMY-1和前列腺癌PC-3和DU145细胞24 h后,倒置光学显微镜下观察细胞形态的变化,并采用CCK-8法检测各组细胞活性的变化.用不同浓度的根皮素(0、20、50和100 μmol/L)处理PC-3细胞24 h后,采用DAPI染色法观察细胞核破裂的情况,FCM法检测根皮素处理后前列腺癌PC-3细胞凋亡率和细胞周期分布的变化;同时,采用蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白剪切型聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(cleaved-poly ADP-ribose polymerase-1,cleaved-PARP-1)、cleaved-caspase 3、cleaved-capase 8、cleaved-caspase 9、X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)、survivin、Bcl-2、Bax以及细胞周期蛋白cyclin B1表达水平的变化.建立人前列腺癌PC-3细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察根皮素腹腔注射治疗后小鼠移植瘤生长体积以及体质量的变化,并计算抑瘤率.采用蛋白质印迹法检测小鼠肿瘤组织中凋亡相关蛋白的表达水平.结果:根皮素浓度为50和100 μmol/L时,对人正常前列腺基质细胞WPMY-1的形态没有影响,仅对前列腺癌PC-3和DU145细胞的形态有影响.与空白对照组相比,根皮素浓度为20、50和100μmol/L时对前列腺癌PC-3和DU145细胞活力均有明显的抑制作用(P值均＜0.01).采用浓度为20、50和100 μmol/L的根皮素处理PC-3细胞24 h后,PC-3细胞的核破裂率分别为(27.0±2.0)％、(47.0±1.5)％和(63.0±3.0)％,明显高于空白对照组的(3.0±1.0)％(P值均＜0.001);凋亡率分别为(20.0±1.0)％、(32.0±2.0)％和(42.6±1.5)％,明显高于空白对照组的(4.0±1.0)％(P值均＜0.001).根皮素(100 μmol/L)处理PC-3细胞24 h后,细胞中cleaved-PARP-1、cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 8和cleaved-caspase 9蛋白的表达水平均较空白对照组明显升高(P值均＜0.01),而XIAP、survivin和Bcl-2蛋白的表达水平均明显降低(P值均＜ 0.001).PC-3细胞被阻滞在G2/M期,并且cyclin B1蛋白的表达水平明显降低(P＜0.001).根皮素可以抑制裸鼠移植瘤的生长(P＜0.05),并上调肿瘤组织中cleaved-PARP-1和cleaved-caspase 3蛋白的表达水平,下调survivin蛋白的表达水平(P值均＜0.001),但是对小鼠体质量无明显影响(P＞0.05).结论:根皮素通过下调cyclin B1、XIAP、survivin和Bcl-2蛋白水平,以及上调cleaved-PARP-1、cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 8和cleaved-caspase 9蛋白的表达水平,诱导PC-3细胞周期阻滞和细胞凋亡,最终抑制肿瘤细胞生长.

关键词：前列腺肿瘤、根皮素、细胞周期、细胞凋亡

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分类号：R737.25(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目编号:81272850,81472415National Natural Science Foundation of China81272850, 81472415

在线出版日期：2017-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：545-555,586