Prdx4蛋白表达水平的改变对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡和迁移的影响

摘要：

目的:探讨上调或沉默过氧化物还原酶4 (peroxiredoxin 4,Prdx4)蛋白表达对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡和迁移的影响.方法:利用脂质体瞬时转染法将重组质粒pcDNA3.0-HA-Prdx4(以空载体pcDNA3.0-HA为对照组)和特异性针对人Prdx4基因的siRNA (Prdx4-siRNA)(以阴性对照-siRNA为对照组)分别转染A549细胞;采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测Prdx4 mRNA和蛋白的表达水平;CCK-8法和免疫荧光技术分别检测A549细胞的增殖和凋亡情况;细胞划痕实验和Transwell小室法检测A549细胞迁移能力的改变.结果:转入重组质粒pcDNA3.0-HA-Prdx4的A549细胞中Prdx4 mRNA和蛋白的表达水平明显上调(P值均＜ 0.05),转入Prdx4-siRNA的A549细胞中Prdx4 mRNA和蛋白的表达水平明显下调(P值均＜0.05).CCK-8检测结果显示,Prdx4过表达的A549细胞在24、48和72 h时的D450nm值均明显高于对照组(P值均＜ 0.05),并且96 h时的D450nm值(2.241±0.068和1.596±0.103)差异更加明显(P＜0.01);沉默Prdx4表达后A549细胞在48、72和96 h时的D450nm值明显低于对照组(P值均＜0.01).免疫荧光结果显示,Prdx4过表达的A549细胞在顺铂刺激24和48 h后凋亡细胞数与对照组相比明显减少,差异均具有统计学意义(P＜0.05和P＜0.01);沉默Prdx4表达的A549细胞在顺铂刺激24和48 h后,凋亡细胞数明显多于对照组(P＜0.05和P＜0.01).划痕实验结果显示,Prdx4过表达A549细胞的愈合率明显高于对照组(P＜0.01);沉默Prdx4表达的A549细胞的愈合率明显低于对照组(P＜0.01).Transwell迁移实验结果显示,Prdx4过表达的A549细胞穿过小室膜的细胞数明显多于对照组(P＜0.01);沉默Prdx4表达的A549细胞穿过小室膜的细胞数明显少于对照组(P＜0.01).结论:Prdx4可促进A549细胞的增殖和迁移并抑制其凋亡,其有可能成为临床治疗肺腺癌的一个潜在靶点.

关键词：癌、非小细胞肺、过氧化物还原酶4、细胞增殖、细胞凋亡、细胞运动

所属期刊栏目：37

分类号：R734.2(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目编号:81171958National Natural Science Foundation of China 81171958

在线出版日期：2017-07-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：340-349