大鼠增殖抑制基因过表达对C6胶质瘤细胞侵袭的抑制作用及其机制探讨

摘要：

目的:研究大鼠增殖抑制基因(rat hyperplasia suppressor gene,rHSG)过表达对胶质瘤C6细胞侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:用携带rHSG基因的重组腺病毒Adv-rHSG-GFP感染胶质瘤C6细胞,同时设置Adv-GFP感染的阴性对照组以及仅PBS处理的空白对照组.采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测各组细胞中rHSG的表达变化.然后,采用细胞划痕愈合实验和Transwell迁移及侵袭实验分别检测rHSG过表达对胶质瘤C6细胞迁移和侵袭的影响,细胞免疫荧光法和细胞黏附实验分别分析rHSG过表达后C6细胞骨架形成和黏附能力的变化,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法测定各组细胞中Rho/Rock信号通路关键分子Ras同源基因家族成员A(Ras homolog gene family,member A,RhoA)、Ras相关的C3肉毒底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,Rac1)、细胞分裂周期蛋白42 (cell division cycle 42,Cdc42)、Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1 (Rho associated coiled-coil forming protein kinase 1,Rock1)和Rock2的表达水平.结果:重组腺病毒Adv-rHSG-GFP感染48和72 h后,胶质瘤C6细胞中rHSG的表达水平明显升高(P值均＜0.01).与2个对照组相比,Adv-rHSG-GFP组细胞的划痕愈合率明显降低(P值均＜0.01),迁移、侵袭和黏附细胞数均明显减少(P值均＜0.05).rHSG过表达后C6细胞形态发生变化,丝状伪足缩短,部分呈片状;而且细胞中RhoA、Rac1、Cdc42、Rock1和Rock2的mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P值均＜0.05).结论:rHSG过表达可以抑制胶质瘤C6细胞的侵袭,其作用机制可能与阻滞Rho/Rock信号通路有关.

关键词：神经胶质瘤、基因表达调控、肿瘤、细胞运动、Rho相关激酶类、增殖抑制基因

所属期刊栏目：37

分类号：R730.264(肿瘤学)

在线出版日期：2017-03-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：126-134,162