双氢青蒿素对前列腺癌PC-3细胞中p16INK4A蛋白表达的调控作用及其机制探讨

摘要：

目的:探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人前列腺癌PC-3细胞株中p16INK4A表达的影响及其可能的分子机制.方法:用不同浓度(25、50和100 μmol/L)的DHA处理PC-3细胞48 h,同时设置DHA未处理的空白对照组.然后,采用FCM法检测各组细胞的凋亡率和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;亚硫酸氢盐基因组测序法检测p16INK4A基因的甲基化水平;实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分别检测DNA甲基化转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)和p16INK4A的mRNA及蛋白表达水平;细胞免疫荧光法检测p16INK4A蛋白的定位及表达情况.结果:与空白对照组相比,各浓度DHA处理组的PC-3细胞凋亡率和ROS水平均明显升高(P值均＜ 0.05).DHA处理后,PC-3细胞中p16INK4A基因的甲基化水平明显降低(P＜0.05),DNMT1 mRNA和蛋白的表达水平也明显降低(P值均＜ 0.05),而p16INK4A mRNA和蛋白表达水平明显升高(P值均＜ 0.05).p16INK4A蛋白在细胞核及细胞质中均有表达;与空白对照组相比,DHA处理组的p16INK4A蛋白荧光强度明显提高(P＜0.05).结论:DHA可能通过下调DNMT1表达,使p16INK4A基因的甲基化水平降低,从而恢复p16INK4A蛋白的表达,最终诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡,并伴有ROS的产生.

关键词：前列腺肿瘤、青蒿素类、细胞凋亡、DNA甲基化、p16INK4A基因、双氢青蒿素

所属期刊栏目：37

分类号：R737.25(肿瘤学)

资助基金：重庆市教委科学技术研究项目编号:KJ110324 Science and Technology Research Project of Chongqing Municipal Education Commission No.KJ110324

在线出版日期：2017-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：41-49