汉防己甲素衍生物对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的抑制作用及其机制

摘要：

目的:探讨汉防己甲素衍生物HL-42和HL-49对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、克隆形成能力以及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:采用不同浓度的HL-42和HL-49分别作用MDA-MB-231细胞后,应用MTT法检测细胞的增殖情况;平板克隆形成实验检测对细胞克隆形成的影响;2和10 μmol/L的HL-42和HL-49分别作用于MDA-MB-231细胞24 h后,应用FCM法检测对细胞凋亡的影响;分别采用半定量RT-PCR法和蛋白印迹法检测细胞中Bloom综合征解旋酶(Bloom's syndrome helicase,BLM)、人乳腺癌易感基因1(breast cancer susceptibility gene 1, BRCA1)和同源重组修复的关键酶Rad51 mRNA及蛋白的表达水平.结果:125～10μrnol/L的HL-42和HL-49处理24、48和72h后,MDA-MB-231细胞的增殖受到抑制,呈时间和浓度依赖性(P值均＜0.05),HL-42作用于MDA-MB-231细胞24、48和72h的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值分别为(8.27±0.27)、(3.92±0.39)和(2.72±0.14) μmol/L;相应的HL-49的IC50值分别为(5.30±0.45)、(3.19±0.32)和(1.64±0.12)μmol/L;而阳性对照顺铂的IC50值则为(61.96±3.83)、(29.08±4.11)和(16.19±2.53) μmol/L.0.2、0.5、1和5μmol/L的HL-42和HL-49均可抑制MDA-MB-231细胞克隆的形成(P值均＜0.001).2和10 μmol/L的HL-42和HL-49均可诱导MDA-MB-231细胞凋亡,且有浓度依赖性(P值均＜0.05).2 μmol/L的HL-42处理24 h后,MDA-MB-231细胞中的Rad51 mRNA及蛋白的表达水平无明显变化(P值均＞ 0.05);10 μmol/L的HL-42处理24 h后,MDA-MB-231细胞中的Rad51 mRNA及蛋白的表达水平下调(P值均＜ 0.05);2和10 μmol/L的HL-42处理24 h后,MDA-MB-231细胞中BLM和BRCA1 mRNA及蛋白表达水平无明显变化(P值均＞0.05).2μmol/L的HL-49处理24 h后,MDA-MB-231细胞中的BRCA1 mRNA及蛋白表达水平无明显变化(P值均＞0.05),10 μmol/L的HL-49处理24h后,MDA-MB-231细胞中的BRCA1 mRNA及蛋白表达水平下调(P值均＜ 0.01);2和10 μmol/L的HL-49处理24 h后,MDA-MB-231细胞中的BLM、Rad51 mRNA及蛋白表达水平下调(P值均＜0.01).结论:汉防己甲素衍生物HL-42和HL-49可明显抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖并诱导其凋亡,作用机制可能是HL-42和HL-49部分阻断了细胞内DNA损伤修复通路.

关键词：乳腺肿瘤、粉防己碱、细胞增殖、细胞凋亡

所属期刊栏目：36

分类号：R737.9(肿瘤学)

在线出版日期：2017-01-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1320-1329