miR-34b抑制膀胱癌BIU-87细胞的增殖

摘要：

目的:探讨微RNA-34b(microRNA-34b,miR-34b)对人膀胱癌BIU-87细胞增殖的影响及其可能的作用机制.方法:应用实时荧光定量PCR检测膀胱癌BIU-87细胞、人膀胱上皮永生化细胞SV-HUC-1和人肾小管上皮细胞HK-2中miR-34b的表达水平.将miR-34b mimic转染至BIU-87细胞后,应用MTT法和克隆形成实验检测BIU-87细胞的增殖和克隆形成情况.miR-34b mimic与泛素特异肽酶22(ubiquitin-specific peptidase 22,USP22)-野生型(wide type,WT)或USP22-突变型(mutation type,Mut)重组载体共转染后,应用萤光素酶报告系统检测miR-34b是否与USP22基因3'-非翻译区(3'-untranslated region,3'-UTR)结合.应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测miR-34b mimic转染后,BIU-87细胞中USP22 mRNA和蛋白的表达水平.结果:膀胱癌BIU-87细胞中miR-34b的表达水平低于肾小管上皮细胞HK-2和膀胱上皮永生化细胞SV-HUC-1 (P值均＜0.05).miR-34bmimic转染后,BIU-87细胞的增殖率和克隆形成率低于空白对照组(BIU-87细胞未进行任何转染)和阴性对照组[BIU-87细胞转染miRNA mimic negative control (miRNA mimic NC)](P值均＜0.05).萤光素酶报告系统检测结果显示,miR-34b能特异性地与USP22基因3'-UTR结合,miR-34b mimic与重组载体USP22-WT共转染组细胞的萤光素酶活性下降(P＜0.05).miR-34b mimic转染组BIU-87细胞中USP22蛋白的表达水平低于空白对照组和阴性对照组(P值均＜ 0.05).结论:miR-34b可抑制膀胱癌BIU-87细胞的增殖,这一作用可能与USP22的表达有关.

关键词：膀胱肿瘤、微RNAs、细胞增殖、基因表达调控、泛素特异肽酶22

所属期刊栏目：36

分类号：R737.14(肿瘤学)

在线出版日期：2016-03-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：12-19