尿路上皮癌抗原1基因沉默可抑制人胰腺癌细胞的体外迁移和侵袭

摘要：

目的:检测尿路上皮癌抗原1 (urothelial cancer associated 1,UCA1)在胰腺癌组织和细胞系中的表达情况,探讨靶向沉默UCA1基因表达对胰腺癌PANC-1细胞体外迁移和侵袭的影响及其可能的分子机制.方法:应用实时荧光定量PCR法检测UCA1在胰腺癌组织及其癌旁组织和胰腺癌细胞系(PANC-1、SW1990、BxPC-3和Capan-2)中的表达水平.分别构建插入针对UCA1基因的特异性shRNA(UCA1-shRNA)和阴性对照shRNA (negative control-shRNA,NC-shRNA)的重组表达质粒,并将它们转染至胰腺癌PANC-1细胞中,随后采用实时荧光定量PCR法检测UCA1表达的变化.应用细胞划痕愈合实验和Transwell侵袭实验分别检测沉默UCA1基因表达对PANC-1细胞体外迁移和侵袭能力的影响.蛋白质印迹法检测UCA1基因沉默对上皮-间质转化相关分子钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)表达的影响.结果:UCA1在胰腺癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织(P＜0.000 1),且UCA1在伴有转移的癌组织中表达水平高于无转移者(P=0.002).4株胰腺癌细胞系中均能检测到UCA1 mRNA表达,其中PANC-1细胞中相对高表达(P＜0.01).UCA1-shRNA转染PANC-1细胞后,UCA1的表达水平明显降低(P＜0.01).相较于NC-shRNA转染组,UCA1-shRNA转染后的PANC-1细胞体外迁移(P＜0.05)和侵袭能力(P＜0.01)均明显降低.UCA1-shRNA转染组细胞中vimentin表达水平明显下调(P＜0.01),而E-cadherin表达水平则明显上调(P＜0.01).结论:UCA1在胰腺癌中高表达,通过shRNA转染靶向沉默该基因表达可明显抑制胰腺癌细胞的体外迁移和侵袭,其机制可能与UCA1调控上皮-间质转化有关.

关键词：胰腺肿瘤、基因沉默、肿瘤转移、尿路上皮癌抗原1、上皮-间质转化

所属期刊栏目：35

分类号：R735.9(肿瘤学)

在线出版日期：2015-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1192-1199