沉默PES1基因表达对结肠癌细胞恶性表型的抑制作用

摘要：

目的:探讨核仁蛋白PES1 (pescadillo homolog 1)对结肠癌细胞恶性表型的影响.方法:构建针对PES1基因的shRNA干扰质粒,将其转染结肠癌HCT116细胞,经G418筛选耐药细胞克隆,蛋白质印迹法验证靶基因的沉默效果.采用MTT法、平板克隆形成实验、裸鼠成瘤实验、Transwell迁移及侵袭实验和FCM法分别检测沉默PES1表达对HCT116细胞增殖、克隆形成、体内成瘤、体外迁移和侵袭以及凋亡的影响,并采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测细胞增殖和凋亡相关蛋白的表达水平.结果:成功获得PES1稳定低表达的结肠癌HCT116细胞.沉默PES1表达后,HCT116细胞的增殖、克隆形成和裸鼠体内成瘤能力均明显降低(P值均＜ 0.01),细胞迁移和侵袭能力明显减弱(P值均＜0.01),细胞凋亡水平明显提高(P＜0.05).PES1表达被抑制后,HCT116细胞中细胞周期蛋白D1 (cyclin D1)和Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P值均＜0.01),而Bcl-2相互作用杀伤蛋白(Bcl-2 interacting killer,BIK)、prune同源蛋白2 (prune homolog2,PRUNE2)和基质金属蛋白酶组织抑制因子3(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase 3,TIMP3)的mRNA表达水平明显升高(P值均＜ 0.01).结论:PES1可能对结肠癌细胞的多种恶性表型起促进作用.

关键词：结肠肿瘤、RNA干扰、细胞增殖、细胞凋亡、核仁蛋白PES1

所属期刊栏目：35

分类号：R735.35(肿瘤学)

在线出版日期：2015-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1175-1184