5-氮杂胞苷和顺铂联合TRAIL诱导肺癌A549细胞凋亡及其机制探讨

摘要：

目的:探讨5-氮杂胞苷、顺铂联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)诱导人非小细胞肺癌A549细胞凋亡的作用及可能的分子机制.方法:用5-氮杂胞苷单药、TRAIL单药、5-氮杂胞苷+TRAIL以及5-氮杂胞苷+顺铂+ TRAIL联合用药分别作用A549细胞后,采用MTT法和FCM法分别检测细胞增殖抑制率和细胞凋亡率.采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测5-氮杂胞苷处理前后A549细胞中死亡受体4(death receptor 4,DR4)mRNA及蛋白表达量的变化.甲基化特异性PCR(methylation-specificPCR,MSP)法检测5-氮杂胞苷处理前后A549细胞中DR4基因的启动子甲基化状态.结果:5-氮杂胞苷+TRAIL组A549细胞的增殖抑制率及凋亡率均明显高于TRAIL单药组(P值均＜0.05),而5-氮杂胞苷+顺铂+TRAIL组A549细胞的增殖抑制率及凋亡率均明显高于5-氮杂胞苷+TRAIL组(P值均＜ 0.05).A549细胞在经5-氮杂胞苷处理前,其DR4基因启动子呈甲基化状态,DR4 mRNA及蛋白表达水平均较低;经5-氮杂胞苷处理后,DR4基因启动子呈非甲基化状态,DR4表达水平明显提高,并呈时间依赖性(P值均＜ 0.05).结论:5-氮杂胞苷可以逆转DR4基因启动子的甲基化状态,使其表达上调,增强TRAIL诱导A549细胞凋亡的作用,逆转细胞对TRAIL的耐药性.同时,亚毒性剂量的顺铂可进一步增强TRAIL对A549细胞的凋亡诱导作用.提示5-氮杂胞苷、顺铂联合TRAIL可能成为治疗肺癌的一种新策略.

关键词：癌、非小细胞肺、氮杂胞苷、顺铂、TNF相关凋亡诱导配体、细胞凋亡、DNA甲基化、死亡受体4

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分类号：R734.2(肿瘤学)

在线出版日期：2015-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：858-865