微RNA-21与BIM蛋白在逆转肺腺癌细胞对EGFR-TKIs耐药中的相互拮抗作用

摘要：

目的:探索微RNA-21(microRNA-21,miR-21)以及与Bcl-2相互作用的细胞死亡调节子(Bcl-2 interacting mediator of cell death,BIM)蛋白在人肺腺癌细胞发生表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)-酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)获得性耐药过程中的作用及调控关系.方法:将重组质粒pcDNA3.1-BIM和空质粒pcDNA3.1分别瞬时转染至吉非替尼耐药的肺腺癌细胞株PCgR中,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中miR-21的表达水平,细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法检测PC9R细胞对吉非替尼的敏感性变化.同时,采用慢病毒感染的方法干扰PC9R细胞株中miR-21的表达,然后采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测细胞中BIM基因的表达水平,CCK-8法检测PC9R细胞对吉非替尼的敏感性变化.另外,在干扰miR-21表达的PC9R细胞中转染pcDNA3.1-BIM重组质粒,然后采用CCK-8法检测PC9R细胞对吉非替尼的敏感性变化.结果:重组质粒pcDNA3.1-BIM转染后,PC9R细胞中BIM的表达水平明显提高(P＜0.01),miR-21的表达水平也相应升高(P＜0.01).慢病毒干扰miR-21表达后,PC9R细胞中miR-21的表达水平明显降低(P＜0.05),BIM的表达水平也相应降低(P＜0.05).下调miR-21水平和上调BIM表达均能提高PC9R细胞对吉非替尼的敏感性(P值均＜0.05),而在下调miR-21表达的同时上调BIM表达,更加提高了细胞对吉非替尼的敏感性(P＜0.05).结论:miR-21和BIM基因在逆转吉非替尼耐药过程中可能起关键作用,并且二者存在相互拮抗的作用.

关键词：癌、非小细胞肺、抗药性、肿瘤、微RNAs、基因表达调控、基因、BIM、吉非替尼

所属期刊栏目：35

分类号：R734.2(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目编号:81172101;National Natural Science Foundation of China No.81172101

在线出版日期：2015-07-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：613-620