miR-154-3p抑制非小细胞肺癌细胞转移的研究

摘要：

目的:检测微RNA(microRNA,miR)-154-3p在非小细胞肺癌(nonsmall cell lung cancer,NSCLC)组织和细胞系中的表达情况,并探讨其在NSCLC细胞转移中可能的作用机制.方法:采用实时荧光定量PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)法检测NSCLC组织及其癌旁组织中、发生转移和未发生转移的NSCLC组织中、NSCLC细胞系(A549、H292、H1975、95D和SPC-A-1)和人胚肺细胞(WI38)中miR-154-3p的表达水平.采用脂质体法将miR-154-3p-模拟物(mimics)转入A549和H292细胞,以miR-154-3p-阴性对照(miR-154-3p-negative control,miR-154-3p-NC)作为阴性对照;分别采用划痕实验和Transwell小室法检测miR-154-3p对A549和H292细胞迁移和侵袭能力的影响;蛋白质印迹法检测miR-154-3p过表达后对上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志蛋白上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白-1(zonula occludens-1,ZO-1)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)表达的影响.利用生物信息学软件预测miR-154-3p的潜在靶基因,采用双荧光素酶报告基因系统和蛋白质印迹法进一步验证预测结果.结果:miR-154-3p在NSCLC组织(P＜0.001)、发生转移的NSCLC组织(P＜0.05)和NSCLC细胞系(P＜0.01)中的表达水平均低于相应的对照组.过表达miR-154-3p后,A549和H292细胞的迁移和侵袭能力减弱(P值均＜ 0.05);E-cadherin和ZO-1蛋白的表达水平上调(P值均＜ 0.05);A549细胞中vimentin蛋白的表达水平下调(P＜0.01),H292细胞中N-cadherin蛋白的表达水平下调(P＜0.05).双荧光素酶报告基因和蛋白质印迹法检测结果提示,miR-154-3p能负调控BMI1蛋白的表达.结论:miR-154-3p在NSCLC中呈低表达,其过表达可以抑制NSCLC细胞的迁移和侵袭能力,阻碍NSCLC细胞发生EMT,BMI1可能为其靶基因之一.

关键词：癌、非小细胞肺、微RNAs、肿瘤转移、上皮-间质转化

所属期刊栏目：35

分类号：R734.2(肿瘤学)

在线出版日期：2015-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：498-507