二甲双胍通过抑制p38MAPK信号通路逆转卵巢癌细胞对顺铂的耐药性

摘要：

目的:探讨二甲双胍是否能够逆转卵巢癌细胞对顺铂的耐药性,以及其可能的作用机制.方法:CCK-8法检测二甲双胍作用后卵巢癌细胞顺铂耐药株C13K和CP70细胞对顺铂的耐药性变化,以及转染针对切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-complemention 1,ERCC1)的特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)后C13K和CP70细胞耐药性的变化.实时荧光定量PCR法检测不同浓度二甲双胍作用后,C13K和CP70细胞中ERCC1基因表达的变化.蛋白质印迹法检测二甲双胍作用后C13K和CP70细胞中腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)信号通路的激活和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)信号通路的抑制情况,以及联合或不联合AMPK信号通路阻断剂Compound C作用后ERCC1蛋白的表达情况.同时,蛋白质印迹法检测p38MAPK信号通路抑制剂SB203580作用后耐药细胞中ERCC1蛋白表达的变化,以及二甲双胍作用联合p38MAPK siRNA转染前后耐药细胞中ERCC1蛋白的表达变化.结果:二甲双胍能够逆转C13K和CP70细胞对顺铂的耐药性(P＜0.05).二甲双胍作用能够降低C13K和CP70细胞中ERCC1 mRNA和蛋白的表达水平(P＜0.05),并激活AMPK信号通路(P＜0.05);而联合应用AMPK信号通路阻断剂Compound C可以阻断二甲双胍的这种作用(即ERCC1蛋白表达水平升高)(P＜0.01).p38MAPK信号通路抑制剂SB203580作用后,C13K和CP70细胞中ERCC1蛋白表达水平降低(P＜0.05);而二甲双胍作用可降低p38MAPK的磷酸化水平(P＜0.01),抑制p38MAPK信号通路.二甲双胍作用转染了p38MAPK siRNA的C13K和CP70细胞后,ERCC1蛋白的表达水平无明显变化(P＞0.05).结论:二甲双胍可能逆转卵巢癌顺铂耐药株对顺铂的耐药性,并且这一作用可能是通过抑制p38MAPK信号通路和降低细胞中ERCC1的表达而实现的.

关键词：卵巢肿瘤、二甲双胍、抗药性、肿瘤、顺铂、DNA修复、p38丝裂原活化蛋白激酶类、切除修复交叉互补基因1

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分类号：R737.31(肿瘤学)

资助基金：National Natural Science Foundation of China No.81202070国家自然科学基金资助项目编号:81202070

在线出版日期：2015-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：129-138