miR-126在食管癌组织中低表达并抑制食管癌EC109细胞的增殖和迁移

摘要：

目的:探讨微小RNA(microRNA,miRNA,miR)-126在食管癌组织中的表达及miR-126对食管癌EC109细胞增殖和迁移的影响.方法:应用实时荧光定量PCR法检测24例食管癌组织及其相应癌旁组织中miR-126及SOX2 (sex determining region Y-box 2) mRNA的表达.将miR-126模拟物(mimics)或其阴性对照(miR-negative control,miR-NC)转染至EC109细胞后,应用实时荧光定量PCR法检测EC109细胞中miR-126的表达水平,MTT法和Transwell小室法分别检测细胞的增殖能力和迁移能力.构建野生型和突变型SOX2基因3’-端非翻译区(3’-untranslated region,3’-UTR)双荧光素酶报告系统,检测萤火虫荧光素酶的相对活性,以验证miR-126对SOX2基因的作用靶点.应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测转染miR-126 mimics后,EC109细胞中SOX2 mRNA及其蛋白的表达水平.免疫组织化学法检测食管癌组织及其相应癌旁组织中SOX2蛋白的表达.结果:食管癌组织中miR-126的表达水平明显低于相应的癌旁组织(P＜0.01),SOX2 mRNA的表达水平明显高于相应的癌旁组织(P＜0.05),且miR-126与SOX2的表达呈负相关(r=-0.837,P＜0.001).miR-126mimics转染后,EC109细胞中miR-126的表达水平明显高于阴性对照组(P＜0.01),细胞的增殖能力和迁移能力明显低于阴性对照组(P＜0.05,P＜ 0.01).miR-126与SOX2基因的2个预测结合靶点都能特异性结合.转染miR-126 mimics后,EC109细胞中SOX2 mRNA及蛋白的表达水平明显低于阴性对照组(P＜0.01).食管癌组织中SOX2蛋白的阳性表达率明显高于相应的癌旁组织(P＜0.01).结论:miR-126在食管癌组织中呈低表达,且对食管癌EC109细胞的增殖和迁移能力具有抑制作用.SOX2可能是miR-126的靶基因之一.

关键词：食管肿瘤、微RNAs、细胞增殖、细胞运动、miR-126、基因、SOX2

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分类号：R735.1(肿瘤学)

在线出版日期：2015-02-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：55-64