趋化因子受体CX3CR1表达沉默对人肝细胞癌Huh7细胞的作用及机制研究

摘要：

目的:探讨趋化因子CX3C受体1(chemokine CX3C receptor 1,CX3CR1)对人肝细胞癌Huh7细胞的作用及其机制.方法:将靶向沉默CX3CR1表达的重组腺病毒Ad-siCX3CR1感染至人肝细胞癌Huh7细胞,然后应用RT-PCR和蛋白质印迹法检测Huh7细胞中CX3CR1的表达水平,采用MTT、FCM、划痕愈合实验和Transwell小室法分别分析CX3CR1表达沉默对Huh7细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响,再通过蛋白质印迹法检测磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)-Akt信号通路相关蛋白Akt及其磷酸化水平的变化.同时,用不同浓度的PI3K抑制剂LY294002作用感染了Ad-siCX3CR1的Huh7细胞后,分别采用蛋白质印迹法和Transwell侵袭实验检测LY294002对CX3CR1介导的Akt表达和细胞侵袭能力的影响.结果:感染Ad-siCX3CR1后,肝细胞癌Huh7细胞中CX3CR1表达被明显抑制(P＜0.001),细胞的增殖、迁移和侵袭能力均明显增强(均P＜0.001),凋亡能力则明显降低(P＜0.01).沉默CX3CR1表达后,Huh7细胞中Akt的磷酸化水平升高(P＜0.001),且PI3K抑制剂LY294002能有效逆转CX3CR1介导的Akt磷酸化和细胞侵袭(均P＜0.001).结论:沉默趋化因子受体CX3CR1表达可以促进人肝细胞癌Huh7细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制细胞凋亡,其机制可能与活化PI3K-Akt信号通路有关.

关键词：癌、肝细胞、基因沉默、受体、趋化因子CX3CL1、细胞增殖、细胞凋亡、细胞迁移分析、癌基因蛋白质v-akt

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分类号：R735.7(肿瘤学)

在线出版日期：2015-02-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：46-54