靶向RECK基因的miR-374b-5p对裸鼠人胃癌移植瘤生长的影响

摘要：

目的:探讨微RNA-374b-5p(microRNA-374b-5p,miR-374b-5p)及其靶基因反转录富含半胱氨酸蛋白(reversion-inducing-cysteine-rich protein with Kazal motifs,RECK)在胃癌发生和发展中的作用.方法:采用人胃癌MGC-803细胞建立BABL/c裸鼠移植瘤模型,当移植瘤体积达到60 mm3左右时,将小鼠随机分为3组(每组5只),即空白对照组、阴性对照组[体内转染无意义微RNA序列(miR-374b-5p negative control inhibitor)]和miR-374b-5p抑制组(体内转染miR-374b-5p inhibitor),并观察各组移植瘤的生长情况.在接种MGC-803细胞后第35天时(最后一次治疗3d后)处死各组小鼠,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察移植瘤标本的病理学特征;实时荧光定量-PCR (real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)检测移植瘤组织中miR-374b-5p的表达水平;荧光素酶活性检测验证miR-374b-5p是否靶向作用于RECK基因;分别采用RFQPCR和免疫组织化学法检测移植瘤中RECK mRNA和蛋白的表达情况.结果:miR-374b-5p抑制组移植瘤体积在转染miR-374b-5p inhibitor 9 d后(即接种细胞的第23天后),开始明显小于空白对照组和阴性对照组(P＜0.05),而空白对照组和阴性对照组小鼠的移植瘤体积差异无统计学意义.病理学检测结果提示,miR-374b-5p抑制组移植瘤的恶性程度较空白对照组和阴性对照组明显下降.miR-374b-5p抑制组移植瘤中miR-374b-5p的表达水平均较空白对照组和阴性对照组明显下调(P＜0.05).荧光素酶报告载体系统证实,RECK是miR-374b-5p直接调控的靶基因;miR-374b-5p抑制组移植瘤中RECK mRNA及蛋白的表达水平均显著高于空白对照组和阴性对照组(P均＜0.05).结论:miR-374b-5p可能通过RECK通路在胃癌的发生和发展中扮演着癌基因的角色.

关键词：胃肿瘤、微RNAs、小鼠、裸、RECK基因

所属期刊栏目：34

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;湖南省科技厅项目

在线出版日期：2015-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：975-981