骨形态发生蛋白-2促进人肺癌细胞上皮-间质样转化及机制的研究

摘要：

目的:研究骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)对肺癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响,并探讨其可能的分子作用机制.方法:用不同质量浓度的BMP-2(10、50和100 μg/mL)处理人肺腺癌A549细胞24 h,采用免疫组织化学法检测A549细胞中上皮细胞标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)表达水平的变化,蛋白质印迹法检测A549细胞中E-cad、间质细胞标志物波形蛋白(vimentin)及基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)表达的变化;分别采用划痕实验和Matrigel基质胶小室法检测对A549细胞迁移及侵袭能力的影响;FCM法检测细胞凋亡的变化.随后,通过p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路抑制剂SB203580联合BMP-2(100μg/mL)作用于A549细胞,检测p38 MAPK信号通路阻断后对上述A549细胞EMT、迁移和侵袭能力及凋亡的影响.结果:BMP-2呈浓度依赖性降低A549细胞中E-cad蛋白的表达,并促进间质标志物vimentin蛋白及MMP-2蛋白表达的增加;A549细胞在BMP-2(100 μg/mL)刺激下划痕愈合率明显高于空白对照组(P＜0.05),穿过小室膜的细胞数显著增多(P＜0.05),细胞的早期凋亡率降低(P＜0.05).SB203580能部分抑制BMP-2诱导的A549细胞中E-cad表达的降低(P =0.039),以及vimentin和MMP-2蛋白表达的增高 (P=0.023和P=0.040);BMP-2联合SB203580作用下A549细胞划痕愈合率较BMP-2单药组降低(P=0.029),穿过小室滤膜的细胞数较BMP-2单药组明显减少(P=0.009),细胞的早期凋亡率较BMP-2单药组增加(P=0.046).结论:BMP-2能够在体外促进肺腺癌A549细胞发生EMT,抑制细胞的早期凋亡,并促进细胞的迁移和侵袭,这一过程与p38MAPK信号通路的激活有关.

关键词：肺肿瘤、骨形态发生蛋白质类、上皮-间质转化、肿瘤转移、p38丝裂原活化蛋白激酶

所属期刊栏目：34

分类号：R734.2(肿瘤学)

资助基金：上海市卫生局面上资助项目2010065

在线出版日期：2014-10-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：771-780