短发夹RNA下调Notch2表达对食管鳞癌Eca109细胞增殖的影响

摘要：

目的:探讨通过转染短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)下调Notch2表达的方法阻滞Notch2信号通路对食管鳞癌Eca109细胞增殖的影响.方法:首先应用实时荧光定量-PCR法检测包括食管鳞癌Eca109细胞在内的多种肿瘤细胞中Notch受体的表达水平.然后将无效shRNA (Control-shRNA)和针对Notch2基因的shRNA(Notch2-shRNA)分别转染高表达Notch2的Eca109细胞.实时荧光定量-PCR法检测转染后Notch2及其下游靶基因Hes1的mRNA表达,蛋白质印迹法检测转染后Notch2蛋白的表达,CCK-8(cell counting kit-8)法检测Eca109细胞增殖情况,FCM法检测细胞周期变化.结果:食管鳞癌Eca109细胞中Notch2 mRNA高表达.与Control-shRNA转染组相比,Notch2-shRNA转染后Eca109细胞中Notch2 mRNA及蛋白表达明显下调(P＜0.01),下游靶基因Hes1的mRNA表达水平明显降低(P＜0.01).Notch2-shRNA转染72 h后,Eca109细胞增殖率明显降低(P＜0.05); G0/G1期细胞所占百分率为(70.66±6.25)％,明显高于Control-shRNA组的(45.34±1.88)％和未转染对照组的(47.10±1.70)％(P＜0.01).结论:Notch2在体外培养的食管鳞癌Eca109细胞中高表达,下调Notch2表达可以通过诱导G0/G1期细胞阻滞而减缓Eca109细胞的体外增殖.

关键词：食管肿瘤、受体、Notch2、RNA干扰、细胞增殖、细胞周期

所属期刊栏目：34

分类号：R735.1(肿瘤学)

在线出版日期：2014-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：501-506,540