微RNA-21在个旧肺鳞癌细胞生长中的调控机制研究

摘要：

目的:探讨微RNA-21(microRNA-21,miR-21)水平下调对个旧肺鳞癌YTMLC-90细胞增殖、迁移及凋亡的影响,以及其作用机制是否与人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)、抗凋亡基因Bcl-2和基质金属蛋白酶抑制基因RECK (reversioninducing-cysteine-rich protein with kazal motifs)表达调控有关.方法:首先采用实时荧光定量PCR法检测miR-21在正常肺上皮细胞和不同类型肺癌细胞中的表达量,验证个旧肺鳞癌YTMLC-90细胞中miR-21相对高表达.采用蛋白质印迹法及实时荧光定量PCR法检测转染pGCMV/EGFP-hsa-anti-miR-21干扰质粒后,个旧肺鳞癌细胞YTMLC-90中miR-21靶基因PTEN、RECK及Bcl-2表达水平的变化.MTS法及细胞划痕实验分别检测转染后YTMLC-90细胞的增殖及迁移能力.透射电子显微镜和FCM法分别对转染后YTMLC-90细胞的凋亡进行定性和定量分析.结果:相较于正常肺上皮细胞BEAS-2B,个旧肺鳞癌YTMLC-90细胞中miR-21表达水平明显较高(P＜0.05).经pGCMV/EGFP-hsa-anti-miR-21干扰质粒转染后,YTMLC-90细胞中miR-21水平下调,而其下游作用靶点PTEN及RECK蛋白水平上调(P＜0.05),Bcl-2蛋白水平下调(P＜0.05).与未转染对照组相比,转染后YTMLC-90细胞的增殖及迁移能力均明显降低(P＜0.05),而细胞凋亡率明显增加(P＜0.05).结论:miR-21可能通过调节靶基因PTEN、RECK及Bcl-2的表达促进个旧肺鳞癌细胞的生长和迁移,抑制细胞凋亡,提示miR-21可能是治疗个旧肺鳞癌的一个潜在靶点.此外,从分子遗传学的角度否定了个旧肺鳞癌是一种特殊种类的肺癌.

关键词：肺肿瘤、微RNAs、转染、基因表达调控、细胞凋亡、细胞增殖、细胞迁移分析

所属期刊栏目：34

分类号：R734.2(肿瘤学)

在线出版日期：2014-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：387-396