人参皂苷Rg1对人白血病TF-1细胞EPOR信号通路的影响

摘要：

目的:探讨人参皂苷Rg1诱导急性髓系白血病M6型人红白血病TF-1细胞凋亡及其对红细胞生成素受体(erythropoietin receptor,EPOR)通路的影响,以及可能的机制.方法:不同浓度人参皂苷Rg1处理TF-1细胞后,应用CCK-8(cell counting kit-8)法检测细胞的增殖活性,FCM法检测并在透射电子显微镜下观察人参皂苷Rg1诱导TF-1细胞的凋亡,FCM法和免疫荧光法检测TF-1细胞中EPOR蛋白的表达水平和分布情况,实时荧光定量-PCR法检测TF-1细胞EPOR mRNA的表达,蛋白质印迹法检测人参皂苷Rg1作用后TF-1细胞的红细胞生成素(erythropoietin,EPO)反应性以及TF-1细胞中EPOR、磷酸化EPOR、酪氨酸激酶JAK2 (Janus tyrosine kinase 2)、磷酸化AK2、信号转导和转录激活因子5(signal transducers and activators of transcription 5,STAT5)、磷酸化STAT5、Bax、Bcl-2和caspase-3(激活型)蛋白的表达.结果:人参皂苷Rg1(12.5、25、50、100和200 μmol/L)作用24、48和72 h后,TF-1细胞的增殖受到抑制(P＜0.05).人参皂苷Rg1(12.5、25和50 μmol/L)作用48 h后,TF-1细胞的早期凋亡率高于人参皂苷Rg1未处理的对照组(P＜0.05),透射电子显微镜下可见TF-1细胞出现凋亡变化.FCM法和免疫荧光检测结果均显示,人参皂苷Rg1作用后TF-1细胞膜表面EPOR的表达明显减少,并且TF-1细胞EPOR mRNA的表达水平下调(P＜0.05).与对照组比较,人参皂苷Rg1作用后TF-1细胞EPOR总蛋白的表达水平无明显变化,但降低了TF-1细胞对EPO的反应性,磷酸化EPOR的表达水平明显下调,Bax和caspase-3(激活型)蛋白的表达水平明显上调,Bcl-2以及EPOR下游JAK2、磷酸化JAK2、STAT5和磷酸化STAT5的表达水平均明显下调(P均＜ 0.05).结论:人参皂苷Rg1可明显抑制TF-1细胞的增殖并促进其凋亡,其促凋亡机制可能与降低TF-1细胞对EPO的反应性,下调EPOR下游相关蛋白的表达并激活caspase-3的表达有关.

关键词：白血病、细胞凋亡、受体,红细胞生成素、人参皂苷Rg1、细胞,TF-1

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分类号：R733.7(肿瘤学)

资助基金：1.国家自然科学基金面上项目81171929;2.重庆市教委科学技术研究项目KJ110328

在线出版日期：2014-03-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：113-120