10.3781/j.issn.1000-7431.2012.12.003
TET1对肾癌786-O细胞增殖的影响及其相关机制
目的:应用小干扰RNA (small interfering RNA,siRNA)沉默TET1 (ten-eleven translocation 1)基因表达,探索其对人肾癌786-O细胞增殖的影响及其可能的机制.方法:采用脂质体转染法将靶向TET1基因的TET1-siRNA转染人肾癌786-O细胞,实验设空白对照组、阴性对照组和干扰组(TET1-siRNA组).分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测转染TET1-siRNA后,786-O细胞中TET1、SUZ12 (suppressor of zeste 12)、EZH2 (enhancer of zeste homolog 2)和EED(embryonic ectoderm development)mRNA及其蛋白的表达;MTT法和克隆形成实验检测786-O细胞的增殖活性和克隆形成率;FCM检测786-O细胞周期.结果:与空白对照组比较,转染TET1-siRNA后,786-O细胞中TET1 mRNA及其蛋白的表达水平分别下降了(85.13±0.03)%和(56.41±0.09)%,差异有统计学意义(P<0.05); 786-O细胞的增殖受到抑制,克隆形成能力明显下降,G0/G1期细胞百分比明显增加(P<0.05); SUZ12 mRNA及其蛋白表达水平下调(P<0.05),EED和EZH2蛋白表达水平变化不明显(P>0.05).结论:TET1-siRNA可显著下调肾癌786-O细胞中TET1蛋白的表达水平,明显抑制786-O细胞的增殖,并使细胞阻滞于G1期,其机制可能与TET1调控SUZ12的表达,影响其靶基因对PRC2 (polycomb repressive complex 2)的招募有关.
肾肿瘤、细胞增殖、RNA干扰、TET、SUZ12
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R737.11(肿瘤学)
国家自然科学基金资助项目81171883
2013-02-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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