10.3781/j.issn.1000-7431.2010.09.002
转染CD40L基因对结肠癌细胞增殖和侵袭的影响
目的:本研究通过将CD40L基因转染小鼠结肠癌colon26细胞,观察其对小鼠结肠癌细胞生物学特性的影响,以期探讨CD40L作为结肠癌基因治疗靶点的可行性.方法:经脂质体将CD40L基因转染小鼠结肠癌colon26细胞后,采用半定量RT-PCR法、Western印迹法和激光共聚焦显微镜检测CD40L mRNA及蛋白的表达情况,新型四氮唑盐MTS比色法检测CD40L基因转染对细胞生长的影响,FCM法检测其对细胞表面分子表达的影响,半定量RT-PCR法检测细胞中基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)mRNA的表达情况,以及Transwell法检测细胞的侵袭能力变化.结果:RT-PCR检测结果显示,转染CD40L基因的小鼠结肠癌colon26细胞中CD40L mRNA的表达量为1.09±0.12,与转染空质粒细胞和未转染细胞相比,分别上调了59.21%和58.33%,差异有统计学意义(P<0.05);而基因转染后colon26/CD40L细胞中MMP-2 mRNA水平降低.MTS法检测结果显示,colon26/CD40L细胞的生长速度与未转染细胞无明显变化.FCM法检测结果显示,colon26/CD40L细胞表面共刺激分子CD80和CD86水平升高.同时,Transwell实验结果显示,colon26/CD40L细胞侵袭能力下降(P<0.05).结论:CD40L基因提高了结肠癌colon26细胞的免疫原性,降低了结肠癌细胞的侵袭能力,抑制了结肠癌细胞的恶性表型.
结肠肿瘤、CD40配体、基因转染技术、细胞增殖、肿瘤侵润
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R735.35(肿瘤学)
河北省科技攻关计划项目09276101D-29
2010-10-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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