程序性细胞死亡蛋白5在米非司酮诱导前列腺癌细胞凋亡中的协同作用

摘要：

目的:观察程序性细胞死亡蛋白5(programmed cell death 5,PDCD5)在米非司酮(mifepristone,MIF)诱导的前列腺癌细胞凋亡中的作用,并探讨其机制.方法:MTT法检测不同浓度(5、10、20、50、100 μmol/L)的MIF作用前列腺癌PC-3M细胞24～96 h后的吸光度(D)值,找到最佳作用时间及浓度.将真核表达载体PCI-neo-PDCD5用脂质体介导的方法转染入PC-3M细胞后,采用细胞免疫荧光法检测PDCD5蛋白的表达水平.在转染PDCD5基因的细胞中加入最佳作用浓度的MIF,继续培养24、48 h后,采用TUNEL和吖啶橙(acrine orange,AO)/溴化乙锭(ethidium bromide,EB)法检测细胞凋亡情况,Western印迹法检测凋亡相关蛋白caspase-3的表达变化.结果:MTT检测结果显示,与对照组相比,5、10 μmol/L MIF组的D值没有显著变化(P>0.05),20、50和100 μmol/L MIF组的D值显著降低(P<0.05),说明MIF对前列腺癌PC-3M细胞的抑制作用呈时间和剂量依赖性.PDCD5基因真核表达载体成功转染入PC-3M细胞,并得到高表达.TUNEL和AO/EB检测结果显示,与对照组及单独应用MIF组相比,转染PDCD5基因并加入MIF后的细胞凋亡率显著增加(P<0.01);Western印迹结果显示,caspase-3蛋白在PDCD5与MIF联合作用时的表达明显增加(P<0.01).结论:外源性PDCD5在MIF诱导的前列腺癌细胞凋亡中有明显的正协同作用,推测其有望成为前列腺癌临床治疗的一个辅助药物.

关键词：前列腺肿瘤、细胞凋亡、凋亡调节蛋白质类、米非司酮、转染、基因、PDCD5

所属期刊栏目：30

分类号：R737.25(肿瘤学)

资助基金：1.黑龙江省教育厅科学技术研究面上项目计划编号:115310842.哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目2007RFXXS039

在线出版日期：2010-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：566-570