p53正向凋亡调控因子在吉西他滨诱导胰腺癌细胞凋亡过程中的作用

摘要：

目的:研究吉西他滨对人胰腺癌AsPC-1细胞体外生长的作用机制.方法:用脂质体转染法将含有p53正向凋亡调控因子(p53 upregulated modulator of apoptosis,PUMA)反义核酸的真核表达载体pcDNA3.1-PUMAAS和空载体pcDNA3.1导入AsPC-1细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆.将转染载体的AsPC-1阳性克隆细胞和未转染载体的AsPC-1细胞分别暴露于浓度为1、5、10和15 μmol/L的吉西他滨溶液中作用72 h.RT-PCR和Western印迹法检测不同组细胞经吉西他滨作用72 h后的PUMA表达水平,MTT检测细胞生长抑制情况, FCM、Hoechst 33258荧光染色和TUNEL法检测细胞凋亡情况.结果:吉西他滨促进AsPC-1细胞凋亡,抑制细胞生长,并有明显的剂量依赖性,在细胞凋亡的同时伴有PUMA表达的上调;当细胞转染PUMA反义核酸抑制PUMA表达后,受吉西他滨作用的细胞中PUMA蛋白表达明显降低,同时伴有细胞凋亡的抑制及细胞增殖明显增加.结论:吉西他滨促进体外AsPC-1细胞凋亡,并抑制细胞生长,其诱导细胞凋亡与上调PUMA表达有关.

关键词：胰腺肿瘤、细胞凋亡、DNA、反义、吉西他滨、凋亡调节蛋白质类、p53正向凋亡调控因子

所属期刊栏目：29

分类号：R735.9(肿瘤学)

资助基金：江苏省科学研究基金资助项目JS2007-021

在线出版日期：2010-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1040-1044