2,3-吲哚醌诱导成神经细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡过程中部分凋亡调控基因的变化

摘要：

目的:研究2 ,3-吲哚醌(2, 3-dioxoindoline, isatin,ISA)诱导人成神经细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的分子机制.方法:体外培养人成神经细胞瘤SH-SY5Y细胞,将SH-SY5Y细胞随机分为对照组和ISA不同浓度(100、200和400 μmol/L )处理组,采用Hoechst 33258荧光染色、DNA ladder分析细胞凋亡,RT-PCR检测不同浓度ISA处理后基因VEGF、bcl-2、 bax、survivin及p53在mRNA水平上表达的变化,FCM法检测caspase-3蛋白表达的变化.结果:不同浓度的ISA(0、100、200和400 μmol/L)作用SH-SY5Y细胞48 h后,在荧光显微镜下观察到400 μmol/L ISA组细胞出现典型的凋亡形态学改变:细胞核染色质聚集、碎裂,细胞质浓缩;琼脂糖凝胶电泳显示400 μmol/L ISA处理组细胞出现明显的梯状条带.RT-PCR结果显示:随着ISA作用浓度的增加,bcl-2、VEGF和survivin mRNA的表达均逐渐减少(P<0.05),bax mRNA表达水平未见明显变化(P>0.05) ;而随着ISA浓度的增加, p53 mRNA表达水平逐渐增加(P<0.05),并呈浓度依赖关系.FCM结果显示,随着ISA作用浓度的增加,活化的caspase-3蛋白表达率分别为18.38%、26.93%和35.66%,明显高于对照组的11.23%(P<0.05).结论:ISA能明显诱导SH-SY5Y细胞凋亡,其机制可能与ISA促进p53 mRNA转录、抑制bcl-2和survivin mRNA转录以及使细胞内活化的caspase-3蛋白水平增加有关.另外,ISA能抑制VEGF mRNA转录,对抑制肿瘤生长及转移有重要意义.

关键词：神经细胞瘤、吲哚醌类、细胞凋亡、基因表达调控、肿瘤

所属期刊栏目：29

分类号：R73-361;R739.4(肿瘤学)

资助基金：山东省科技发展计划资助项目2002BB1CBA1

在线出版日期：2009-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：745-748,815