反转录病毒介导的HPV16 E6-siRNA对SiHa细胞增殖及抗药性的影响

摘要：

目的:探讨反转录病毒介导的靶向人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16 E6基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对HPV16阳性宫颈癌SiHa细胞的影响.方法:收集产反转录病毒PA317细胞的病毒上清液感染SiHa细胞,G418筛选获得HPV16 E6基因稳定沉默的细胞克隆(SiHa/16E6),同时设立载体对照(SiHa/pSUPER)和正常细胞对照(SiHa).RT-PCR检测HPV16 E6和E7 mRNA的表达水平,Western印迹法检测p53、Rb、caspase 3及其底物多聚ADP-核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)蛋白的表达,MTT法检测细胞的增殖活性及细胞对顺铂的敏感性.结果:感染后与SiHa细胞对照组相比,各时间点的E6和E7 mRNA表达水平均有所下降,p53和Rb蛋白表达水平增高,caspase-3和PARP剪切后的活性条带增加,感染后40 d细胞的增殖活性下降;在同一药物浓度下,感染后20 d的细胞存活率显著降低,顺铂的IC50值为(3.92±2.48) μg/mL.而SiHa/pSUPER组与SiHa细胞对照组相比,差异无统计学意义.结论:反转录病毒介导的HPV16 E6-siRNA可有效沉默SiHa细胞中E6和E7基因的表达,抑制细胞增殖,并提高细胞对顺铂的敏感性.

关键词：宫颈肿瘤、RNA干扰、反转录病毒科、人乳头状瘤病毒16、基因表达、细胞增殖、抗药性

所属期刊栏目：29

分类号：R737.33(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30571957

在线出版日期：2009-06-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：438-442