信号接头蛋白crk在宫颈癌Caski细胞恶性潜能中的作用

摘要：

目的:探讨信号接头蛋白crk在宫颈癌恶性潜能中发挥的作用,以及RNA干扰沉默宫颈癌Caski细胞株中的crk基因表达后,观察能否有效阻抑宫颈癌Caski细胞的增殖、侵袭和转移等恶性潜能.方法:将构建有crk基因的RNA干扰载体 pSUPER-crki,采用脂质体介导法转染Caski细胞;随后采用RT-PCR和Western 印迹法检测各组细胞转染前后crk mRNA和蛋白表达水平的变化;用细胞生长曲线、软琼脂克隆形成实验、Transwell小室体外侵袭实验、细胞骨架荧光染色等方法,检测宫颈癌细胞生物学行为的变化.结果:Western 印迹法检测证实,Caski细胞中存在着高表达的crk蛋白;转染pSUPER-Crki质粒后,能明显抑制Caski细胞内源性crk mRNA和蛋白的表达;crk mRNA表达水平下降74.8 %,蛋白表达水平下降72.4 %.crk-RNAi组与空白对照组及空载体组比较,细胞生长速度减慢、软琼脂克隆形成率下降、穿过人工基底膜的细胞数减少(P<0.05),其细胞的黏着斑减少,骨架染色也明显弱于以上2种对照组细胞.结论:信号接头蛋白crk可能参与宫颈癌Caski细胞的黏着斑组装和细胞骨架重组,诱发癌细胞增殖、侵袭、转移等恶性潜能.以crk基因为靶向的RNAi可有效抑制Caski细胞中的crk基因的表达,能有效阻抑Caski的恶性潜能,有望成为新的宫颈癌基因治疗的分子靶点.

关键词：宫颈肿瘤、RNA、小分子干扰、原癌基因蛋白质c-crk

所属期刊栏目：29

分类号：R737.33;R730.231(肿瘤学)

在线出版日期：2009-04-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：103-107