shRNA干扰对肺癌细胞内Skp2和p27水平及其生长的影响

摘要：

目的:探讨干扰肺腺癌SPC-A-1细胞中Skp2 (S-phase kinase associated protein, Skp 2)基因的发夹结构RNA (small hairpin RNA, shRNA)对肺癌细胞Skp2和p27基因表达的影响及对细胞生长的影响.方法:设计、合成特异性的shRNA序列并与pGenesil-1质粒载体连接转染SPC-A-1细胞,经过稳定筛选后的肺癌细胞,通过RT-PCR和Western印迹法分别检测细胞内Skp2、p27mRNA和蛋白的表达情况,MTT法检测细胞生长情况并绘制生长曲线.结果:在转染干扰RNA后SPC-A-1细胞内的Skp2mRNA及蛋白表达下降明显,而p27蛋白水平却明显上升,这与抑制了Skp2表达导致p27降解减少有关.生长曲线表明细胞生长受到了抑制.结论:成功构建了针对Skp2基因的shRNA真核表达载体,能有效抑制肺癌细胞生长,并使得skp2基因表达下降,p27基因的表达增多,为肺癌细胞的基因治疗提供了实验依据.

关键词：癌、非小细胞肺、RNA小分子干扰、Skp2基因、p27基因

所属期刊栏目：28

分类号：R734.2(肿瘤学)

在线出版日期：2008-08-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：485-488,493