双自杀基因系统对胰腺癌细胞Capan-2的特异性杀伤作用

摘要：

目的:研究腺病毒介导的VEGF启动子驱动CD/TK融合基因系统(Ad-VEGFP-CDTK)对胰腺癌细胞Capan-2的特异性杀伤作用.方法:重组腺病毒载体体外感染表达VEGF的Capan-2细胞株,观察其感染效率,并以RT-PCR方法检测转基因细胞内CDTK的表达;然后给予不同浓度的前药更昔洛韦 (ganciclovir, GCV)和5-氟胞嘧啶 (5-fluorocytosine,5-FC),MTT法观察该体系对Capan-2细胞增殖的影响及其旁观者效应;电镜观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞周期和DNA含量的变化;建立小鼠Capan-2细胞动物模型,计算抑瘤率.结果:两种腺病毒对Capan-2的感染率相似,其感染率随腺病毒效价的增高而递增.RT-PCR方法检测发现转染Ad-VEGFP-CDTK的细胞有目的基因表达.MTT法检测显示前药呈剂量依赖性抑制Capan-2细胞生长,且观察到该体系明显的旁观者效应.电镜下可见Capan-2细胞有凋亡改变;流式细胞仪测定用药组出现典型的凋亡峰,细胞周期分析显示治疗后细胞G0/G1期比率增多,G2/M及S期细胞减少.体内裸鼠移植瘤模型的建立成功,实验组肿瘤体积缩小.结论:VEGF启动子可调控双自杀基因体系选择性杀伤胰腺癌细胞Capan-2,并诱导细胞凋亡,可显著抑制人胰腺癌裸鼠移植瘤的生长.

关键词：胰腺肿瘤、基因、转基因、自杀、细胞、培养的、异种移植模型抗肿瘤试验

所属期刊栏目：27

分类号：R730.59(肿瘤学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA217171;广东省自然科学基金013072

在线出版日期：2008-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：768-771