10.3781/j.issn.1000-7431.2007.07.018
荧光实时定量PCR检测非小细胞肺癌组织及外周血中RRM1 mRNA表达水平的方法
目的:建立检测非小细胞肺癌患者肿瘤组织及外周血RRM1 mRNA表达水平的实时定量荧光PCR方法,比较不同标本的检测方法及效果,为临床应用该基因表达水平预测药物疗效提供方法基础.方法:构建RRM1基因的质粒标准品,运用ABI7000 PCR仪进行实时定量分析,探索最佳反应条件并建立标准曲线用以检测临床标本.结果:检测了18例患者的肺癌及正常肺组织标本,同时检测了17例患者的外周血标本,以β-actin为管家基因计算得肺癌组织相对表达量平均为4.46×10-3,正常肺组织为3.43×10-3,外周血为2.54×10-3.Ct值与模板起始浓度对数值之间有良好的线性相关.结论:所建SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法能成功检测肺癌组织及外周血单个核细胞RRM1 mRNA表达水平,检测方法基本相同,有较高的敏感性与特异性,可应用于临床检验工作.
癌、非小细胞肺、核苷酸还原酶类、基因表达、实时定量荧光PCR
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R730.43;R734.2(肿瘤学)
广州市科技局重点科技攻关计划2001-Z-044-01;广东省医药卫生科研项目2003-1;广东省名医工程项目2004-25
2007-09-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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