短发夹状RNA抑制子宫颈癌CaSki细胞HPV 16 E7基因的研究

摘要：

目的:研究短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)构建的人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16 E7siRNA表达载体转染宫颈癌细胞株CaSki细胞后,在体内外对CaSki细胞E 7基因的抑制作用.方法:利用脂质体将构建有HPV16 E7特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)的表达载体P1、P2、P3转染CaSki细胞,以实时荧光定量RTPCR及流式细胞仪检测不同时间点E7 mRNA和蛋白的变化,并将载体P1转染后的细胞接种到裸鼠皮下,4周后观察裸鼠体内皮下移植瘤体积和质量的差异,并用免疫组化检测瘤体组织中E7蛋白的表达变化.结果:表达载体P1、P2、P3均能抑制CaSki细胞E7 mRNA和蛋白的表达.其中载体P1抑制作用最强,在抗性克隆形成后1周,对E7 mRNA和蛋白的抑制率分别为92.86%、84.21%;在抗性克隆形成后4周,抑制率仍分别为68.95%、62.50%.在接种后4周载体P1组裸鼠体内皮下移植瘤的体积和重量明显小于空载体组和对照组,同时E7蛋白的表达也被有效抑制,抑制率为74.75%.结论:构建有shRNA的E7 siRNA表达载体在体内外可明显抑制E7基因的表达.

关键词：宫颈肿瘤、乳头状瘤病毒、人、RNA干扰、基因、HPV16 E7、CaSki细胞

所属期刊栏目：27

分类号：R737.33;R730.231(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30371483

在线出版日期：2007-05-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：205-209