人源性肺癌噬菌体展示单链抗体库的构建

摘要：

目的:构建人源性肺癌噬菌体单链抗体库,为筛选肺癌相关抗原的抗体奠定基础.方法:提取肺癌转移淋巴结总RNA,用RT-PCR技术扩增人抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,在体外将VH和VL连接成单链抗体(ScFv)基因,并克隆到噬菌粒载体pCANTAB 5E中,电转化至感受态的大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体超感染,形成噬菌体单链抗体库,采用限制性内切酶鉴定其多样性.结果:从肺癌转移淋巴结中成功提取RNA,逆转录PCR扩增出入可变区基因,连接形成单链抗体,最终构建了库容为1.2×108的抗人肺癌单链抗体库.BstN Ⅰ酶切法证明构建的抗体库具有良好的多样性.结论:成功地构建了噬菌体展示的抗人肺癌单链抗体库,为进一步筛选肺癌相关蛋白的可溶性抗体奠定了基础.

关键词：肺肿瘤、抗体、肿瘤、人体、单链抗体(scFv)、噬菌体展示

所属期刊栏目：26

分类号：Q503;R734.2(一般性问题)

资助基金：国家自然科学基金30571552;河南省郑州市科技三项费资助项目052SGYS33210

在线出版日期：2006-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：823-826