survivin基因RNA干涉对宫颈癌细胞凋亡和放射敏感性的影响

摘要：

目的:观察survivin基因siRNA干涉对宫颈癌细胞HeLa凋亡和放射敏感性的影响.方法:通过脂质体介导将含人survivin基因siRNA的重组真核表达质粒pSilencer2.1-s2转染宫颈癌细胞系HeLa,G418筛选阳性克隆,半定量PCR、Western blot分别检测survivin mRNA和蛋白表达,激酶活性检测法测定半胱氨蛋白水解酶-3(caspase-3)活性变化,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,平板克隆形成实验、多靶单击模型拟合细胞存活曲线观察细胞放射敏感性变化.结果:G418筛选形成稳定转染阳性克隆,建立了3组稳定转染细胞系:HeLa-s2(转染重组质粒pSilencer2.1-s2)、HeLa-NC(转染阴性对照质粒pSilencer2.1-NC)和HeLa-U6 neo(转染空载质粒pSilencer2.1-U6 neo).经与HeLa-NC、HeLa-U6 neo和未转染HeLa细胞比较,HeLa-s2 survivin mRNA和蛋白表达明显下降,与HeLa细胞相比,表达抑制率分别为:62.8%和60.1%;caspase-3激酶活性增强,D405达1.26±0.04(P＜0.05);细胞凋亡率为:(29.2±1.4)%,明显升高(P＜0.05);同一剂量X线照射下,平板克隆形成率显著降低(P＜0.05);细胞存活曲线显示:D0、Dq值显著下降,分别为:3.15、1.21(P＜0.05),放射增敏比分别为:2.01(D0值比)、1.77(Dq值比).结论:survivin基因siRNA干涉可通过阻抑HeLa细胞中survivin表达,增强caspase-3激酶活性,诱导细胞凋亡,并显著提高细胞的放射敏感性.

关键词：宫颈肿瘤、基因、survivin、细胞凋亡、放射敏感性、HeLa细胞

所属期刊栏目：26

分类号：R737.33(肿瘤学)

在线出版日期：2006-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：732-737