肝癌细胞系BEL-7402中siRNA表达载体介导靶向c-myc基因的RNA干涉实验研究

摘要：

目的:探索经载体介导的RNA干涉对肝癌细胞c-myc基因表达抑制的可行性.方法:设计并合成2条靶向癌基因c-myc的RNA干涉模板片段,分别将其连接至pSilencer 1.0-U6载体上构建siRNA真核表达载体;脂质体转染法将上述重组质粒转入BEL-7402肝癌细胞株.半定量RT-PCR分析c-myc基因的表达抑制效率,以及c-myc基因表达下调细胞中CDK4、hTERT和Gadd45β基因表达的改变.结果:获得2个能在细胞内有效转录生成靶向c-myc基因siRNA的重组载体pSic-myc-1和pSic-myc-2;其中pSic-myc-2可有效介导肝癌细胞BEL-7402 c-myc基因的表达抑制,抑制率高达90%以上;在c-myc基因经RNAi抑制的细胞中,CDK4和hTERT基因的表达分别下调至85%和57%;而Gadd45β的表达上调约110%.结论:肝癌细胞BEL-7402中c-myc基因的表达可被载体介导诱发的RNA干涉有效抑制,进而导致细胞中与增殖和凋亡相关基因的表达改变.

关键词：癌、肝细胞、基因、c-myc、RNA干扰、基因表达、BEL-7402细胞

所属期刊栏目：26

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：福建省青年科技人才创新项目2004J067

在线出版日期：2006-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：307-310