STAT3特异性小干扰RNA表达载体的构建及其对STAT3表达的抑制

摘要：

目的构建特异性抑制信号转导与转录激活因子3(STAT3)的小干扰RNA(siRNA)表达载体并检测其对STAT3表达及PC-3细胞增殖的抑制作用.方法设计、合成STAT3特异性的短链寡核苷酸,经退火形成双链DNA片段,克隆到pSilen-cerTM2.1-U6载体中,构建STAT3特异siRNA的表达载体,Hind Ⅲ和BamH Ⅰ双酶切及测序鉴定重组体,并转染PC-3细胞,G418筛选出稳定表达细胞株,半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法和免疫印迹法检测STAT3 mRNA和蛋白的表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖活性.结果经双酶切与测序鉴定成功构建STAT3-siRNA表达载体,转染前列腺癌细胞株PC-3可显著抑制细胞中STAT3 mRNA和蛋白的表达水平(抑制率分别为52.4%及50.5%),且细胞增殖活性亦较未转染PC-3细胞显著降低(p＜0.05).结论运用pSilencerTM2.1-U6载体构建的STAT3-siRNA表达载体可有效抑制STAT3的表达及前列腺癌细胞的增殖.

关键词：RNA、小干扰、转录激活因子3、细胞系、肿瘤、PC-3细胞

所属期刊栏目：25

分类号：Q784;R737.25(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2005-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：37-40