MDR1短发夹RNA表达质粒的构建及其功能的初步研究

摘要：

目的构建在哺乳动物细胞中表达MDR1短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的表达质粒,并初步探讨其对耐药肝癌细胞MDR1 mRNA的抑制作用及抗肿瘤药物耐药性的影响.方法根据Genbank中MDR1 mRNA设计的两条多聚核苷酸序列,退火形成双链DNA,再与经双酶切后的载体PGE-1连接,构建pshRNA-MDR1重组质粒,在脂质体的介导下转染肝癌细胞株BEL-7402/ADM,RT-PCR分析MDR1 mRNA的表达,MTT法检测阿霉素对细胞的半数抑制浓度(IC50).结果PCR和DNA测序证实了表达质粒构建成功,并能明显地抑制BEL-7402/ADM MDR1 mRNA的表达,对阿霉素的耐药指数降低了17.5倍(299.2/17.1).结论构建的pshRNA-MDR1表达质粒能有效地抑制转染细胞MDR1 mRNA,从而提高肿瘤细胞的药物敏感性.

关键词：多药耐药、MDR1 mRNA、短发夹状RNA、RNA干扰、BEL-7402/ADM细胞

所属期刊栏目：24

分类号：Q782;R737.9(基因工程（遗传工程）)

资助基金：湖北省卫生厅科研项目JX1B116

在线出版日期：2005-01-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：542-545