人睾丸肿瘤抗原MAGE-E1基因的克隆测序及在原核系统中的表达

摘要：

目的扩增及克隆人的MAGE-E1基因并利用大肠杆菌进行表达.方法从人胶质瘤细胞系BT-325中提取总RNA,用RT-PCR从中扩增出MAGE-E1基因片段.将MAGE-E1基因片段插入载体pGEM-T easy中,经全自动序列分析仪测序正确后,再克隆至表达载体pGEX-4T-2中,构建重组表达载体pGEX-4T-2-MAGE-E1,并转化大肠杆菌进行表达.结果1mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导5 h,MAGE-E1蛋白表达即达高峰,SDS-PAGE及凝胶密度扫描分析表明,表达出Mr约41 000大小的蛋白,占菌体总蛋白的35%.结论成功扩增、克隆MAGE-E1基因,并在大肠杆菌中得到稳定高效表达.

关键词：MAGE-E1、基因克隆、序列测定、基因表达、大肠杆菌

所属期刊栏目：23

分类号：R730.231(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30100218;高等院校骨干教师基金2000-65-66;教育部留学回国人员科研启动基金1999-747

在线出版日期：2003-12-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：380-382