小细胞肺癌2F7单抗ScFv的高效表达及复性研究

摘要：

目的在大肠杆菌中高效表达小细胞肺癌单抗2F7的单链抗体(ScFv),并获得具有生物学活性的ScFv.方法利用PCR方法将2F7单抗重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)通过一人工设计的柔性连接肽(Linker)连接,再将单链抗体基因重组到原核表达载体pQE31中,构建单链抗体高效表达载体pQE-2F7-ScFv.将pQE-2F7-ScFv质粒转化大肠杆菌M15后诱导表达,并对表达产物进行纯化和稀释复性.结果获得了2F7单链抗体的高效表达,表达蛋白大小约27.4kD,以包涵体形式存在.包涵体蛋白在经过变性、纯化和稀释复性后,获得了有功能的单链抗体.结论成功地构建和表达了小细胞肺癌单抗2F7的单链抗体,并对其进行了纯化和复性,将进一步促进2F7单抗小分子抗体的应用.

关键词：单抗2F7、ScFv、表达、复性

所属期刊栏目：23

分类号：R734.2(肿瘤学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA215141;上海市自然科学基金02EB14090

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：3-6