四环素调控的真核表达体系Hep3B Tet-On细胞株的建立

摘要：

目的建立可受四环素诱导调控的高表达外源基因的真核表达体系Hep3BTet-On细胞株,用于基因功能的研究.方法 将pTet-On质粒用脂质体介导法转染Hep3B细胞,经G418筛选后的克隆用有限稀释法进行单克隆化.单克隆分别扩增后,瞬时转染pTRE-luc(编码荧光素酶蛋白)质粒,Dox诱导表达后,检测荧光素酶活性,逐一筛选四环素调控高表达外源基因的Hep3B Tet-On细胞株.结果成功构建了一株受Dox调控的高表达低背景的Hep3B Tet-On细胞株.结论 Hep3B Tet On细胞株可用于外源基因的真核调控高表达,为研究真核基因功能提供了一种有力的实验手段.

关键词：转染、诱导表达、四环素调控

所属期刊栏目：22

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划Z19-02-01-01;国家重点基础研究发展计划973计划G1998051209

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：191-193