hsa-circ-002179靶向miR-143-3p调控自噬-凋亡平衡在胃癌5-氟尿嘧啶化疗耐药性中的作用研究

摘要：

目的 探究hsa-circ-002179靶向miR-143-3p调控自噬-凋亡平衡对胃癌的5-氟尿嘧啶(5-Fu)化疗耐药性的影响.方法 通过5-Fu处理AGS细胞构建5-Fu耐药细胞模型(AGS/5-Fu),采用CCK8法检测5-Fu对AGS和AGS/5-Fu细胞活性的影响,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中hsa-circ-002179和miR-143-3p的表达;通过流式细胞术和Western blot分别检测细胞凋亡水平与自噬相关蛋白LC3、Beclin-1和p62的表达.同时,通过软件预测hsa-circ-002179 与miR-143-3p的结合位点,并采用RIP和双荧光素酶实验验证其结合作用.结果 与对照组比较,耐药组的细胞活性[(172.33±9.53)％比(106.00±6.16)％,P＜0.01]和自噬水平升高、凋亡率(20.5％比 43.8％,P＜0.01)降低,hsa-circ-002179 表达升高[(4.46±0.34)比(1.05±0.66),P＜0.01];转染si-002179后,耐药细胞活性降低[(80.00±2.45)％比(102.67±7.13)％,P＜0.05],而凋亡水平升高(31.3％比21.8％,P＜0.05).RIP和双荧光素酶报告实验证实hsa-circ-002179与miR-143-3p直接结合,且与对照组比较,耐药细胞中miR-143-3p的表达降低[(0.38±0.05)比(1.04±0.07),P＜0.01].并且,hsa-circ-002179能够调控miR-143-3p的水平.同时,miR-143-3p抑制剂处理能够升高转染si-002179后的耐药细胞自噬水平.自噬抑制剂处理降低了耐药细胞的自噬水平和细胞活性,升高凋亡水平;在此基础上转染OE-002179则升高自噬水平和细胞活性,降低凋亡水平,进一步转染miR-143-3p模拟物可以逆转以上变化.结论 hsa-circ-002179靶向miR-143-3p可能可以调控自噬-凋亡平衡,进而影响胃癌细胞的5-Fu化疗耐药性.

关键词：hsa-circ-002179、miR-143-3p、自噬、凋亡、胃癌、5-Fu、化疗耐药性

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分类号：R735.7;R657.3;R392.11

资助基金：浙江省卫健委创新人才项目;绍兴市科学技术局公益性技术应用研究计划项目

在线出版日期：2024-02-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：21-27