瑞戈非尼通过CSF1-R信号通路调节肿瘤相关巨噬细胞增强PD-1抗体在结直肠癌中疗效的研究

摘要：

目的 探讨瑞戈非尼(Reg)通过集落刺激因子(CSF1-R)信号通路调节肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)增强PD-1抗体(PD-1 antibody,anti-PD-1)在结直肠癌中的疗效,并分析其机制.方法 接种结肠癌细胞CT26于24只BALB/c小鼠,建立结直肠癌移植瘤模型,模型小鼠采用随机数字表法分为 CT26 组、CT26+Reg 组、CT26+anti-PD-1 组和 CT26+Reg+anti-PD-1 组 4 个组,每组 6 只,进行药物治疗后观察荷瘤小鼠移植瘤的生长情况.取肿瘤组织,通过Western Blot和免疫组化检测瘤内磷酸化CSF1-R(p-CSF1-R)和CSF1-R表达,流式细胞术检测肿瘤单细胞悬液中TAMs并区分M1、M2表型.提取小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDMs),分别诱导成M1、M2型巨噬细胞,并用Reg处理细胞,qRT-PCR检测相关基因表达水平,Western blot检测巨噬细胞表面CSF1-R蛋白表达.结果 与 CT26 组比较,药物处理后肿瘤体积[(1174.33±56.84)mm3、(1221.00±42.42)mm3、(949.50± 15.92)mm3 比(1451.00±43.10)mm3]和重量[(2.32±0.08)g、(2.40±0.10)g、(1.73±0.08)g 比(3.04± 0.06)g]均显著减小,与单独使用Reg或anti-PD-1比较,Reg和anti-PD-1联合用药物使移植瘤的体积[(949.50±15.92)mm3比(1174.33±56.84)mm3、(1221.00±42.42)mm3]和重量[(1.73±0.08)g 比(2.32±0.08)g、(2.40±0.10)g]进一步减小;Western blot和免疫组化结果显示,Reg处理后,瘤内p-CSF1-R表达显著下调(P＜0.05);流式结果显示Reg处理后,M2型巨噬细胞比例显著下降[(13.67± 1.80)％比(35.33±2.21)％、(21.33±2.36)％、(28.67±1.89)％,(P＜0.05)],M1 型巨噬细胞比例显著增加[(19.00±2.00)％比(5.50±0.96)％、(12.50±1.71)％、(8.00±0.82)％,(P＜0.05)];qRT-PCR 结果也表明,Reg 处理能增加 BMDMs 中 M1 表型比例[IL-23:(1.98±0.08)比(1.00±0.05);IL-12:(3.10±0.12)比(1.00±0.10);CD86:(2.56±0.13)比(1.00±0.10)],并下调 M2 表型比例[Arg1:(0.57±0.04)比(1.00± 0.09);CD206,(0.73±0.08)比(1.00±0.15);CD 163:(0.81±0.07)比(1.00±0.20)],同时 Western blot 结果显示,Reg处理能显著下调M2型巨噬细胞表面p-CSF1-R蛋白的表达水平(P＜0.05).结论 Reg可能通过CSF1-R信号通路调控TAMs,增强anti-PD-1在结直肠癌中的疗效.

关键词：小鼠、结直肠癌、瑞戈非尼、CSF1-R信号通路、肿瘤相关巨噬细胞

所属期刊栏目：33

分类号：R730.53;R392.12;R587.24

资助基金：浙江省医药卫生科技计划项目No.2020KY221

在线出版日期：2023-11-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：909-914