藤黄酸通过IGF-1/IRS-1通路抑制膀胱癌炎症和血管生成的机制研究

摘要：

目的 探究藤黄酸(GA)通过胰岛素样生长因子 1(IGF-1)/胰岛素受体底物蛋白 1(IRS-1)通路对膀胱癌炎症和血管生成的影响.方法 体外培养人膀胱癌细胞 5637 和人膀胱移行细胞癌细胞T24,细胞分三组,Control组、IGF-1 组(100 ng/mL)、IGF-1(100 ng/mL)+GA(0.8 μg/mL)组,CCK8 法检测不同浓度梯度GA对膀胱癌细胞活性的影响.酶联免疫吸附测定法检测各组细胞炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.CCK8 和划痕法分别测定GA处理的膀胱癌条件培养基(CM)对膀胱癌细胞增殖和迁移能力的影响.小管形成法测定GA处理的膀胱癌CM对膀胱癌细胞血管网络形成能力的影响.通过qRT-PCR和Western blot测定GA处理的膀胱癌细胞系CM对膀胱癌细胞细胞内血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体(VEGFR)转录和翻译水平,以及对IRS-1/NF-κB通路的调控影响.结果 IGF+GA组人膀胱癌细胞 5637 和人膀胱移行细胞癌细胞T24 的IL-1β、IL-6、TNF-α分泌量较IGF-1 组均减少[IL-1β:(32.25±2.49)pg/mL比(69.85±6.34)pg/mL,(24.92±3.16)pg/mL比(63.99±4.41)pg/mL;IL-6:(21.87±3.89)pg/mL比(39.54±4.75)pg/mL,(22.44±2.51)pg/mL比(57.69±3.18)pg/mL;TNF-α:(192.08±5.20)pg/mL比(384.78±30.79)pg/mL,(217.03±18.82)pg/mL比(604.30±72.88)pg/mL;P＜0.05].同时,GA处理的CM能减弱HUVEC细胞的增殖、迁移能力和相应的血管网络形成能力.qRT-PCR结果显示,IGF-1+GA-CM组人膀胱癌细胞 5637 和人膀胱移行细胞癌细胞 T24 的VEGF、VEGFR mRNA相对表达量较IGF-1-CM组均降低[VEGF:(1.63±0.25)比(4.45±0.36),(1.57±0.26)比(4.16±0.42);VEGFR:(1.60±0.14)比(5.90±0.48),(1.88±0.18)比(6.20±0.46);P＜0.05],Western blot验证了这一结果.结论 GA可能通过抑制膀胱癌内IGF-1/IRS-1 通路,减轻炎症反应,从而抑制血管生成.

关键词：藤黄酸、IGF-1/IRS-1、膀胱癌

所属期刊栏目：33

分类号：R737.14;R2-03;R977.4

资助基金：台州市第二批社会发展科技计划项目;温岭市社会发展科技项目;浙江中医药大学附属医院科研专项项目

在线出版日期：2023-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：610-616