二甲双胍通过激活Nrf2通路干预PC12细胞H2O2氧化损伤的机制研究

摘要：

目的 探讨二甲双胍对过氧化氢(H2O2)诱导的PC12细胞损伤的保护机制.方法 PC12细胞培养后共设置五组,分别为DMSO组、H2O2组、二甲双胍低(0.5mmol/L)、中(1mmol/L)、高(2mmol/L)剂量组,建立PC12细胞H2O2氧化损伤模型,使用CCK-8法和比色法检测PC12细胞生存率和乳酸脱氢酶(LDH)释放量;采用Hoechst 33342染色法和流式细胞术检测PC12细胞凋亡和活性氧(ROS)水平;qPCR和Western blot法检测核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)通路mRNA和蛋白表达水平;使用小干扰RNA沉默Nrf2检测H2O2诱导细胞的保护作用.结果 与DMSO组比较,二甲双胍低、中和高剂量对PC12细胞有毒性作用[(99.67±1.53)％、(97.00±3.29)％、(96.10±3.46)％比(100.00±0.00)％,P均<0.05];与H2O2组比较,二甲双胍低、中和高剂量对PC12细胞具有保护作用[(64.33±6.08)％、(67.67±7.51)％、(71.23±5.10)％比(61.00±3.61)％,P均<0.05];与H2O2组比较,二甲双胍高剂量+H2O2组LDH释放量显著降低[(91.67±10.41)比(150.45±10.61),P<0.05],细胞凋亡率下降[(12.33±2.08)％比(23.67±5.13)％,P<0.05],ROS含量减少[(1.77±0.25)％比(3.43±0.40)％,P<0.05];与DMSO组比较,二甲双胍低、中和高剂量显著提高Nrf2和HO-1 mRNA[Nrf2 mRNA:(1.24±0.18)、(1.56±0.23)、(1.93±0.02)比(1.02±0.12),P均<0.05;HO-1 mRNA:(1.83±0.07)、(2.22±0.12)、(2.78±0.09)比(1.46±0.18),P均<0.05]和蛋白[Nrf2蛋白:(0.92±0.12)、(1.24±0.18)、(1.86±0.11)比(0.43±0.05),P均<0.05;HO-1蛋白:(1.29±0.18)、(1.83±0.21)、(2.59±0.06)比(0.62±0.09),P均<0.05]表达;与二甲双胍高剂量+H2O2组比较,二甲双胍高剂量+H2O2+siNrf2组细胞生存率显著降低[(59.77±2.25)％比(78.02±7.63)％,P<0.05].结论 二甲双胍可能通过激活细胞内Nrf2/HO-1通路对H2O2诱导的PC12细胞损伤具有保护作用.

关键词：PC12细胞;二甲双胍;Nrf2;H2O2;氧化损伤

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在线出版日期：2021-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：904-908