栀子苷对溃疡性结肠炎模型大鼠的抗炎作用及AMPK/MLCK信号通路的影响

摘要：

目的 探讨栀子苷对溃疡性结肠炎模型大鼠的抗炎作用及腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/肌球蛋白轻链激酶(MLCK)信号通路的影响.方法 90只SD大鼠按随机数字表法分成对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(300mg/kg)、栀子苷低、高剂量组(40、80mg/kg),每组18只.2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导制备溃疡性结肠炎模型大鼠,建模成功后,各组大鼠给予相应药物灌胃4周,对照组及模型组给予等体积生理盐水.测定各组大鼠结肠黏膜损伤指数、疾病活动指数(DAI)评分、大体形态损伤评分,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法及蛋白免疫印迹(Western blot)法测定大鼠结肠组织AMPK、MLCK mRNA和蛋白水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定结肠组织白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果 与对照组比较,模型组结肠黏膜损伤指数[(3.69±0.23)分比(0.00±0.00)分,P<0.05]、DAI评分[(2.69±0.25)分比(0.00±0.00)分,P<0.05]、大体形态损伤评分[(2.26±0.21)分比(0.00±0.00)分,P<0.05]、结肠组织MLCK mRNA[(3.89±0.26)比(0.89±0.16),P<0.05]和蛋白表达[(1.15±0.12)比(0.31±0.07),P<0.05]、IL-2[(654.74±24.54)ng/g比(269.69±15.89)ng/g,P<0.05]、IL-6[(788.99±15.47)ng/g比(242.96±15.78)ng/g,P<0.05]、TNF-α[(610.89±18.14)ng/g比(154.99±18.47)ng/g,P<0.05]水平升高,AMPK mRNA[(1.25±0.85)比(5.36±0.19),P<0.05]和蛋白表达[(0.30±0.06)比(1.33±0.10),P<0.05]水平降低;与模型组比较,柳氮磺胺吡啶组、栀子苷低剂量组、栀子苷高剂量组结肠黏膜损伤指数[(1.01±0.10)分、(2.42±0.18)分、(0.99±0.09)分比(3.69±0.23)分,P均<0.05]、DAI评分[(0.95±0.23)分、(2.04±0.30)分、(1.00±0.22)分比(2.69±0.25)分,P均<0.05]、大体形态损伤评分[(1.01±0.27)分、(1.61±0.31)分、(1.03±0.25)分比(2.26±0.21)分,P均<0.05]、结肠组织MLCK mRNA[(1.29±0.18)、(2.87±0.15)、(1.31±0.18)比(3.89±0.26),P均<0.05]和蛋白[(0.78±0.11)、(0.95±0.12)、(0.79±0.10)比(1.15±0.12),P均<0.05]表达水平、IL-2[(388.87±33.69)ng/g、(585.96±50.47)ng/g、(389.48±35.69)ng/g比(654.74±24.54)ng/g,P均<0.05]、IL-6[(367.47±18.14)ng/g、(664.58±18.47)ng/g、(369.65±18.87)ng/g比(788.99±15.47)ng/g,P均<0.05]、TNF-α[(259.54±20.83)ng/g、(458.96±24.47)ng/g、(255.47±19.59)ng/g比(610.89±18.14)ng/g,P均<0.05]水平降低,AMPK mRNA[(4.06±0.54)、(2.41±0.54)、(4.04±0.39)比(1.25±0.85),P均<0.05]和蛋白[(0.95±0.09)、(0.65±0.07)、(0.94±0.08)比(0.30±0.06),P均<0.05]表达水平升高;且栀子苷高剂量组结肠黏膜损伤指数、DAI评分、大体形态损伤评分、结肠组织MLCK mRNA和蛋白表达水平、IL-2、IL-6、TNF-α水平低于栀子苷低剂量组(P<0.05),AMPK mRNA和蛋白表达水平高于栀子苷低剂量组(P<0.05);与柳氮磺胺吡啶组比较,栀子苷低剂量组结肠黏膜损伤指数、DAI评分、大体形态损伤评分、结肠组织MLCK mRNA和蛋白表达水平、IL-2、IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05),AMPK mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);栀子苷高剂量组和柳氮磺胺吡啶组结肠黏膜损伤指数、DAI评分、大体形态损伤评分、结肠组织AMPK、MLCK mRNA和蛋白表达、IL-2、IL-6、TNF-α水平比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 栀子苷能抑制溃疡性结肠炎模型大鼠肠道损伤及炎症反应;其机制可能与栀子苷增强AMPK mRNA和蛋白表达,抑制MLCK mRNA和蛋白表达,进而抑制AMPK/MLCK信号通路有关.

关键词：大鼠、溃疡性结肠炎、栀子苷、腺苷酸激活蛋白激酶、肌球蛋白轻链激酶

所属期刊栏目：31

分类号：R574.62;G804.7;R254.6

在线出版日期：2021-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：418-424