三七总皂苷经miR-24靶向C-myc对骨关节炎模型大鼠软骨细胞凋亡与增殖的影响
目的 探讨三七总皂苷经微小核糖核酸-24(miR-24)靶向原癌基因(C-myc)对骨关节炎模型大鼠软骨细胞凋亡与增殖的影响.方法 木瓜蛋白酶水溶液注射至SD大鼠膝关节腔内诱导大鼠骨关节炎,分离模型大鼠两侧膝关节骨关节炎软骨;实验设骨关节炎软骨细胞组、三七总皂苷低、中、高剂量组(三七总皂苷终浓度分别为:100、200、400μg/mL)四组,于37℃、5％CO2、20％O2培养72h,培养结束后,采用CCK-8测定软骨细胞活力,吉姆萨染色测定软骨细胞菌落数,流式细胞仪测定软骨细胞凋亡水平,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹(Western bolt)法测定软骨细胞miR-24、C-myc mRNA及C-myc蛋白表达水平.结果 与骨关节炎软骨细胞组比较,三七总皂苷低、中、高剂量组OD值增加[(0.73±0.04)、(0.84±0.01)、(0.92±0.04)比(0.66±0.06),P均<0.05],存活率升高[(69.65±6.41)％、(82.54±5.35)％、(94.21±2.41)％比(54.56±7.53)％,P均<0.05],细胞菌落数升高[(71.65±6.54)个、(83.41±8.14)个、(95.56±7.43)个比(58.23±6.54)个,P均<0.05],细胞miR-24 mRNA表达上调[(2.15±0.35)、(3.54±0.31)、(4.76±0.37)比(1.14±0.20),P均<0.05],凋亡率降低[(6.71±0.26)％、(4.65±0.25)％、(3.10±0.38)％比(8.22±0.34)％,P均<0.05],C-myc mRNA表达下调[(4.53±0.37)、(2.59±0.45)、(0.89±0.38)比(5.24±0.45),P均<0.05],蛋白表达量降低[(3.47±0.41)、(2.49±0.50)、(1.21±0.82)比(5.54±0.63),P均<0.05];随着三七总皂苷剂量的增加,三七总皂苷各剂量组OD值增加,存活率、细胞菌落数增加,细胞miR-24 mRNA表达上调,凋亡率降低,C-myc mRNA表达下调,蛋白表达量降低(P均<0.05),呈剂量依赖性(P<0.05).结论 三七总皂苷能抑制骨关节炎大鼠软骨细胞凋亡,促进骨关节炎大鼠软骨细胞增殖;其机制可能与靶向上调miR-24 mRNA进而抑制C-myc mRNA和蛋白表达有关.
大鼠、三七总皂苷、微小RNA-24、原癌基因、骨关节炎、软骨细胞、凋亡、增殖
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R684.3;R285.5;R329.28
2021-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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