卵泡抑素样蛋白1在维持结肠癌细胞生长中的作用

摘要：

目的 研究卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)在结肠癌细胞表达及其功能.方法 体外通过蛋白质印迹法测定FSTL1在结肠癌细胞株(HT29、HCT116、DLD1)及人正常结肠上皮细胞株HCEC-1CT表达量;将靶向FSTL1基因的小干扰RNA(siRNA)慢病毒(LV-siRNA-FSTL1)和阴性对照慢病毒(LV-siRNA-NC)分别感染DLD1细胞,将两组细胞系通过皮下注射法建立结肠癌异种移植瘤裸鼠模型,同时设置未感染细胞作为空白对照(BC)组,观察接种4周后三组异种移植瘤重量,Tunel法测定体内结肠癌细胞凋亡;免疫组织化学法检测FSTL1和Ki-67在异种移植瘤组织表达;Western blot检测细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、氨基末端激酶(JNK)、蛋白激酶B(Akt)和核因子κB抑制蛋白(IκB)表达.结果 FSTL1蛋白在三种结肠癌细胞株表达较HCEC-1CT细胞明显上调(P均<0.01);siRNA-FSTL1组、siRNA-NC组和BC组FSTL1蛋白相对表达量分别为(0.12±0.03)、(0.97±0.19)和(1.05±0.18),差异有统计学意义(P均<0.01),干扰效率88.42％;siRNA-FSTL1组裸鼠异种移植瘤重量(0.53±0.07)g显著低于siRNA-NC组(0.84±0.15)g和BC组(1.15±0.26)g,差异有统计学意义(P均<0.01),抑瘤率53.91％;siRNA-FSTL1组细胞凋亡率(16.82±2.33)％明显高于siRNA-NC组(2.93±0.44)％和BC组(3.51±0.32)％,差异均有统计学意义(P均<0.01);与siRNA-NC组比较,siRNA-FSTL1组异种移植瘤FSTL1、Ki-67、p-ERK1/2和p-Akt相对表达量分别降低(58.42±4.53)％、(61.61±6.82)％、(43.23±3.92)％和(47.52±5.14)％,差异有统计学意义(P均<0.05);与siRNA-NC组比较,p-JNK和IκB在siRNA-FSTL1组异种移植瘤表达无显著改变(P>0.05).结论 FSTL1在结肠癌细胞表达显著上调,敲除FSTL1基因可显著抑制结肠癌裸鼠异种移植瘤生长,其作用机制可能与ERK1/2和Akt通路相关,FSTL1有望成为结肠癌基因治疗新的作用靶点.

关键词：裸鼠、结肠癌、FSTL1、慢病毒、ERK1/2、Akt

所属期刊栏目：30

在线出版日期：2020-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：800-804,前插3