苯甲酰芍药苷对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤保护作用及分子机制研究

摘要：

目的 探讨苯甲酰芍药苷对脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用及可能分子机制.方法 将75只SPF级C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分成五组,每组15只:空白对照组(生理盐水200μL)、ALI组(2mg/kg LPS 100μL+生理盐水100μL)、阳性对照组(2mg/kg LPS 100μL+血必净注射液100μL)、苯甲酰芍药苷低剂量组(2mg/kg LPS 100μL+2.5mg/kg苯甲酰芍药苷100μL)、苯甲酰芍药苷高剂量组(2mg/kg LPS 100μL+5.0mg/kg苯甲酰芍药苷100μL),通过腹腔注射LPS构建ALI模型并给予药物干预.称重检测各组肺组织湿/干重比;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理形态变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测ALI小鼠肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平;蛋白免疫印迹(WB)法检测肺组织IκB激酶(IKKβ)/核因子κB(NF-κB)表达及其磷酸化激活水平;荧光定量PRC(RT-PCR)检测ALI小鼠肺组织miR-520c-3p表达;Targetscan 7.0预测miR-520c-3p靶基因;A549转染miR-520c-3p inhibitor验证苯甲酰芍药苷对炎症的调控作用.结果 与ALI组比较,低、高剂量苯甲酰芍药苷均明显降低ALI小鼠肺组织湿/干重比[(5.64±0.14)、(4.75±0.11)比(6.21±0.64),P均<0.05];ALI损伤的肺组织结构得到缓解;ELISA结果 显示,与ALI组比较,低、高剂量苯甲酰芍药苷能明显降低ALI小鼠肺组织TNF-α、IL-6水平[TNF-α:(20.68±1.06)pg/mL、(7.34±0.37)pg/mL比(32.27±1.89)pg/mL,P均<0.05;IL-6:(29.16±2.36)pg/mL、(14.26±1.06)pg/mL比(48.26±3.19)pg/mL,P均<0.05];WB结果 显示,与ALI组比较,苯甲酰芍药苷低、高剂量组IKKβ、NF-κB p65磷酸化水平以及总NF-κB p65水平下降;RT-PCR结果 显示,与ALI组比较,低、高剂量苯甲酰芍药苷有效促进miR-520c-3p在ALI中的表达[(0.51±0.13)、(0.74±0.09)比(0.34±0.11),P均<0.05];Targetscan预测结果 显示,miR-506-3p直接靶向NF-kB p65亚基RELA基因3'UTR序列;补救实验显示,与苯甲酰芍药苷组比较,苯甲酰芍药苷+miR-520c-3p inhibitor组TNF-α、IL-6 mRNA水平明显升高[TNF-α:(3.94±0.49)比(1.55±0.36),P<0.05;IL-6:(6.95±1.21)比(2.11±0.42),P<0.05].结论 苯甲酰芍药苷能有效缓解LPS引起的小鼠ALI病理进程中炎症的发生,其作用机制可能是通过上调miR-520c-3p表达,从而抑制其靶基因NF-κB p65生成,抑制IKKβ/NF-κB信号通路的活化,导致炎症因子TNF-α、IL-6的合成受到抑制.

关键词：小鼠、苯甲酰芍药苷、脓毒症、急性肺损伤、炎症、微小RNA

所属期刊栏目：30

在线出版日期：2020-09-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：698-702,708,后插1